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篇1

[關(guān)鍵詞] 肝細(xì)胞癌；肝膽管細(xì)胞癌；CT診斷；鑒別診斷

[中圖分類號] R445 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2016）12（c）-0190-03

[Abstract] Objective To investigate the application effect of CT in the diagnosis of hepatocellular carcinoma and cholangiocarcinoma. Methods Convenient selection 63 cases of hepatocellular carcinoma and 20 cases of hepatocellular carcinoma in our hospital were studied. The diagnostic efficacy of the two methods of dynamic enhanced scan and spiral CT scan in all patients were compared. Results The pathological diagnosis of CT diagnosis of hepatocellular carcinoma with the rate of 92.1%， the pathological diagnosis of hepatobiliary cancer with the rate of 85.0%； B were 77.8% and 55.0%， pathological diagnosis coincidence rate of CT diagnosis of hepatocellular carcinoma and liver and gallbladder carcinoma were significantly higher than the rate of B ultrasound diagnosis. The number of patients with hepatocellular carcinoma complicated with cirrhosis， HBsAg positive， AFP were significantly higher than those in hepatocholangiocarcinoma patients， with stones and lymph node metastasis were significantly less than those of hepatocholangiocarcinoma patients. There is specific differences between CT diagnosis of hepatocellular carcinoma and hepatocholangiocarcinoma. Conclusion Spiral CT scan and delayed scan can effectively improve the diagnosis of hepatocellular carcinoma and hepatocholangiocarcinoma accuracy and examination results， identify hepatocellular carcinoma and hepatocholangiocarcinoma combination of the clinical data and complications of patients， it has a high clinical value.

[Key words] Hepatocellular Carcinoma； Hepatocholangiocarcinoma； CT Diagnosis； Differential Diagnosis

肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌均屬于原發(fā)性肝癌，其中肝細(xì)胞癌發(fā)病率占原發(fā)性肝癌的90%以上，肝膽管細(xì)胞癌則占5%左右[1]。原發(fā)性感染、起病隱匿，早期患者多缺乏典型癥狀，臨床確診困難，多數(shù)患者就診時已處于中晚期。作為兩種最為常見的原發(fā)性肝癌，肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌具有非常相抵的生物學(xué)行為，膽管細(xì)胞癌確診后即使門靜脈受到侵犯時仍可通過手術(shù)將其腫瘤全部切除，患者預(yù)后良好，但肝細(xì)胞癌侵犯門靜脈時已屬于晚期，患者預(yù)后極差[2]。因此，提高原發(fā)性肝細(xì)胞癌診斷的準(zhǔn)確率以及明確肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌的鑒別診斷對于患者后續(xù)的治療及預(yù)后具有非常重要的作用。超聲和螺旋CT都是臨床診斷肝內(nèi)占位性病變的檢查方式，其中超聲由于具有無創(chuàng)傷、方便、價廉的特點，是首選的檢查方法，但其診斷的準(zhǔn)確率容易受到操作醫(yī)師手法和主觀經(jīng)驗以及肝臟本身質(zhì)地變化等因素的影響，而螺旋CT相比較而言則具有對腫瘤組織高敏感性和高精度的特點[3-4]。為了進(jìn)一步提高原發(fā)性肝癌以及肝細(xì)胞癌與肝膽管細(xì)胞癌的鑒別診斷準(zhǔn)確率，對2013年9月―2016年7月該院收治的經(jīng)手術(shù)證實的63例肝細(xì)胞癌患者及20例肝膽管細(xì)胞癌患者進(jìn)行研究，對B超和CT診斷對其診斷效能進(jìn)行比較，以明確CT的診斷價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院收治的經(jīng)手術(shù)證實的63例肝細(xì)胞癌患者及20例肝膽管細(xì)胞癌患者進(jìn)行研究。其中肝細(xì)胞癌患者中男54例，女9例，年齡32～83歲，平均年齡（53.1±3.9）歲；肝膽管細(xì)胞癌患者中男16例，女4例，年齡33～84歲，平均年齡（62.7±4.5）歲。所有患者均表現(xiàn)出不同程度的腹脹、右上腹隱痛不適、黃疸和乏力等癥狀。研究對象納入標(biāo)準(zhǔn)：①肝臟單發(fā)病灶，病灶內(nèi)無出血及壞死；②2 cm≤病灶直徑≤6 cm；③臨床資料完整；④對增強對比劑無過敏者。

1.2 方法

分別對所有患者行B超檢查和螺旋CT動態(tài)增強掃描。超聲掃描方法：患者常規(guī)禁食12 h，采用DU8、GE-LOGIQS6及HD11XE彩色多普勒超聲診斷儀常規(guī)對肝臟各個切面進(jìn)行檢查，探頭頻率為3.5 MHz，觀察腫瘤形態(tài)、大小、位置、邊界、內(nèi)部和邊緣回聲、包膜；腹腔積液、門靜脈有無癌栓、肝內(nèi)膽管走形、淋巴結(jié)腫大；腫塊內(nèi)部及周邊的血流動力學(xué)變化情況、彩色血流信號顯示情況；門靜脈及肝動脈的血流頻譜變化情況。螺旋CT掃描方法：患者禁食4～6 h，掃描前15 min 10 mg 654-2肌肉注射，5 min飲水1 000 mL。采用GEOptimaCT660螺旋CT檢查。掃描范圍為膈頂至肝臟下緣或盆腔。平掃和增強掃描均選擇層間隔與5 mm準(zhǔn)直掃描，層厚0.625 mm，層間隔拆??；增強掃描所用對比劑為370 mg/mL碘帕醇（進(jìn)口藥品注冊證號H20091012）或350 mg/mL碘佛醇（tyco Healthcare，進(jìn)口藥品注冊證號H20100546，80～100 mL），對比劑注入后28 s行動脈期掃描，注入后50 s行門脈期掃描，注入后120 s行延遲期掃描。以手術(shù)比病理學(xué)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)比較B超與CT診斷的準(zhǔn)確率，分析所有患者CT診斷的特性，同時比較肝細(xì)胞癌與肝膽管細(xì)胞癌患者的臨床資料及并發(fā)癥影像學(xué)表現(xiàn)情況。

1.3 統(tǒng)計方法

采用SPSS 23.0y計學(xué)軟件對該研究中記錄所獲得的數(shù)據(jù)資料進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料用（x±s）表示，采用t檢驗進(jìn)行組間比較；計數(shù)資料用[n（%）]表示，行χ2檢驗，P

2 結(jié)果

2.1 CT診斷特性

63例肝細(xì)胞癌患者檢出瘤體共計92個，腫瘤平均直徑為0.8～13.2（7.1±2.5）cm。CT平掃顯示低密度瘤灶共計73個，CT值為22～54 Hu；等密度瘤灶13個，高密度出血瘤灶2個，稍高瘤灶4個。CT增強掃描：92個瘤灶在肝動脈期均呈現(xiàn)明顯強化，CT值為76～134 Hu，與平掃相比，強化幅度大于20 Hu。其中49個腫瘤顯示不均一強化，可見有更低密度無強度壞死區(qū)域。

20例肝膽管細(xì)胞癌患者檢出瘤體共計20個，腫瘤平均直徑為1.7～13.5（6.5±3.4）cm。CT平掃：20個瘤灶均呈現(xiàn)稍低密度，CT值為16～34 Hu。其中16例邊界不清楚，4例邊界清楚。CT增強掃描：2例增強動脈期掃描邊緣顯示簇狀強化，18例邊緣呈厚薄不等形強化，CT值為40～69 Hu。

2.2 B超與CT診斷準(zhǔn)確率比較

B超和CT分別診斷肝細(xì)胞癌與肝膽管細(xì)胞癌的準(zhǔn)確率情況具體見表1、表2。

根據(jù)表1和表2可知，CT診斷肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌的病理診斷符合率均明顯高于B超，其漏診和誤診率均明顯低于B超（P

2.3 肝細(xì)胞癌與肝膽管細(xì)胞癌患者的臨床資料及并發(fā)生影像學(xué)檢查結(jié)果比較

肝細(xì)胞癌與肝膽管細(xì)胞癌患者的臨床資料及并發(fā)生影像學(xué)檢查結(jié)果比較見表3。

根據(jù)表3可知，肝細(xì)胞癌患者中合并肝硬化、HBsAg陽性、AFP升高等人數(shù)明顯多于肝膽管細(xì)胞癌患者，合并結(jié)石及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者明顯少于肝膽管細(xì)胞癌（P

3 討論

原發(fā)性肝癌是我國高發(fā)的且危害極大的惡性腫瘤，包括肝細(xì)胞癌和膽管細(xì)胞癌兩種較為常見的類型，且發(fā)病率均呈現(xiàn)不斷升高的趨勢。肝細(xì)胞癌預(yù)后極差，其血液供給幾乎全部來自于肝動脈，在出現(xiàn)門靜脈瘤栓時已屬于晚期，治療方式應(yīng)以動脈栓塞或插管化療為主；而肝膽管細(xì)胞癌則是起源于二級膽管及其分支上皮的腺癌，腫瘤血供缺乏，單純的化學(xué)藥物治療效果不佳，藥物很難在病灶處達(dá)到有效濃度，一旦確診則應(yīng)立即給予根治性手術(shù)切除。因此，肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌的早期鑒別診斷對于明確病情，選擇有效的治療方式極為重要。臨床上對肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌的鑒別診斷主要依賴影像學(xué)檢查手段，B超可顯示出腫瘤的征象以及膽管擴張，多數(shù)肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌都能經(jīng)過B超檢查而發(fā)現(xiàn)，但在實際臨床工作中，盡管肝細(xì)胞癌與肝膽管細(xì)胞癌之間存在一定的病理差異，也很容易發(fā)生誤診，主要原因為：①部分肝膽管細(xì)胞癌無膽管受侵表現(xiàn)出現(xiàn)，其影像學(xué)檢查結(jié)果與肝細(xì)胞癌相似；②腫瘤較小，受檢查設(shè)備及檢查者影響容易發(fā)生遺漏；③肝細(xì)胞癌發(fā)生了膽管遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，但因為腫瘤本體處于檢查的遺漏區(qū)域或盲區(qū)，從而造成誤診。近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn)CT檢查在鑒別肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌方面具有很高的價值，尤其是因為二者病理的差異性，使其在CT動態(tài)增強掃描中會有不同的影像學(xué)表現(xiàn)，從而提高兩者鑒別的診斷率[5]。該研究也進(jìn)一步對B超和CT在肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌鑒別診斷中的效能進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示：CT診斷肝細(xì)胞癌的病理診斷符合率為92.1%，肝膽管細(xì)胞癌的病理診斷符合率為85.0%； B超分別為77.8%和55.0%，CT診斷肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌的病理診斷符合率均明顯高于B超。

肝細(xì)胞癌具有肝細(xì)胞癌腫瘤實質(zhì)部分存在較多的呈巢狀及小梁狀排列的腫瘤細(xì)胞，腫瘤間質(zhì)部分纖維少，以毛細(xì)血管為主，腫瘤供血血管豐富，其中肝動脈為主要的供血動脈[6]。CT平掃的表現(xiàn)主要根據(jù)腫瘤組織成分以及瘤灶內(nèi)壞死和出血的差異而有所不同，主要呈現(xiàn)為低密度腫塊或高密度影；螺旋CT掃描動脈期可表現(xiàn)出明顯的增強，增強掃描具有“快進(jìn)快出”的特征性表現(xiàn)[7]。肝膽管癌則起源于肝門部至末梢膽管上皮細(xì)胞，為腺癌，瘤灶中心腫瘤細(xì)胞數(shù)量少且分散，其多存在于腫瘤的邊緣部位；間質(zhì)部分主要為纖維和黏液成分，中心位置分布最為豐富，腫瘤供血血管少[8]。其CT表現(xiàn)主要為：①肝門部膽管癌CT平掃可見膽管明顯擴張，腫瘤和周圍的肝實質(zhì)等密度。早期腫瘤表現(xiàn)出低密度，15 min后表現(xiàn)出高密度，該種動態(tài)變化是診斷的重要依據(jù)。CT增強掃描只可顯示出膽管壁的肥厚。②末梢型膽管癌CT平掃可見邊緣呈現(xiàn)不規(guī)則的均勻低密度占位性病變，病灶周圍可見呈現(xiàn)長管狀、圓形、邊緣銳利的低密度，顯示肝內(nèi)膽管擴張，邊緣不清。對于直徑在2 cm以上腫瘤，CT增強掃描早期可見腫瘤邊緣表現(xiàn)出輕度環(huán)狀增強，晚期腫瘤中心表現(xiàn)出高密度，邊緣則為低密度環(huán)；而直徑2 cm以下的腫瘤則僅表現(xiàn)出輕度增強，有時會與肝細(xì)胞癌混淆[9-10]。

除了上述肝細(xì)胞癌與肝膽管細(xì)胞癌由于病理差異而表現(xiàn)出的不同CT影響表現(xiàn)外，肝細(xì)胞癌患者多伴隨有肝硬化的合并癥狀，HBsAg陽性，AFP升高；而肝膽管細(xì)胞癌患者則多合并出現(xiàn)結(jié)石和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，二者的影響學(xué)資料也會表現(xiàn)出明顯的差異，因此診斷時可參考其綜合進(jìn)行判斷。

綜上所述，螺旋CT增強掃描與延遲掃描能有效提高肝細(xì)胞癌和肝膽管細(xì)胞癌的診斷準(zhǔn)確率，且可結(jié)合患者的臨床資料及并發(fā)癥影像學(xué)檢查結(jié)果對二者進(jìn)行鑒別，具有較高的臨床應(yīng)用價值。

[參考文獻(xiàn)]

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篇2

【關(guān)鍵詞】肝內(nèi)周圍性腫塊型膽管細(xì)胞癌；動態(tài)增強；CT；MRI

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.04.717文章編號：1004-7484（2014）-04-2371-02肝內(nèi)周圍型膽管細(xì)胞癌（Intrahepatic peripheral cholangiocarcinoma，IHPCC）是指發(fā)生于末梢肝內(nèi)小膽管上皮性的腺癌，是肝內(nèi)一種少見的惡性腫瘤，其發(fā)病率僅次于肝細(xì)胞型肝癌，居肝原發(fā)性惡性腫瘤第二位[1]。其主要臨床特征表現(xiàn)為腫塊型膽管細(xì)胞癌，術(shù)前易與肝內(nèi)其它占位性病變相混淆而誤診率較高，及時診斷并給予治療具有非常重要的現(xiàn)實意義。本研究通過對我院收治的26例肝內(nèi)周圍性腫塊型膽管細(xì)胞癌患者行動態(tài)增強CT和MRI掃描，取得了滿意的診斷效果，現(xiàn)報告如下：1資料與方法

1.1一般資料選取我院2011年1月到2013年6月期間26例肝內(nèi)周圍性腫塊型膽管細(xì)胞癌患者，男15例，女11例，年齡38-79歲，平均年齡（56±4.3）歲，病程15天-3年。臨床表現(xiàn)為上腹脹痛不適、畏寒發(fā)熱和乏力納差等。

1.2方法16例患者均行CT平掃和動態(tài)增強掃描，采用德國西門子l6層螺旋CT掃描機，管電壓120kV，管電流130mAs，矩陣512×512，準(zhǔn)直16×0.75mm，層厚2.5mm，間隔1.25mm?；颊咝衅綊吆?，用高壓注射器經(jīng)手背靜脈注射非離子型對比劑碘普胺（1.5ml/kg），注射流率2.5ml/s；開始注射后18-20s、60-65s、240s分別行動脈期、門靜脈期和延遲期掃描。

10例患者均行MRI平掃和動態(tài)增強掃描，采用德國西門子1.5T超導(dǎo)磁共振MRI掃描儀，掃描層厚6-8mm，間隔lmm，矩陣192×256；使用快速小角度激發(fā)橫斷面和冠狀面T1WI，TR130ms、TE4.1ms和T2WI，TR4.4ms、TE64ms。增強掃描時，使用釓噴替酸葡甲胺（Gd-DTPA，0.2mmol/kg）按2.0ml/s流率進(jìn)行靜脈注射，注射后18-20s、60-65s、240s分別行動脈期、門靜脈期和延遲期掃描。

1.3影像分析[1]由兩名熟悉腹部CT和MRI診斷的專業(yè)人員進(jìn)行影像分析，通過協(xié)商取得一致意見并記錄相應(yīng)的結(jié)果。觀察指標(biāo)包括病灶的大小、位置、邊緣情況、信號特征、伴隨表現(xiàn)及動態(tài)增強表現(xiàn)等。2結(jié)果

影像學(xué)上26例患者均為單發(fā)病灶，腫塊直徑為1.7-12cm，平均4.7±1.5cm，病灶位于肝左葉14例（53.85%），右葉12例（46.15%），形態(tài)上多數(shù)呈圓形或卵圓形。行CT平掃時，腫塊表現(xiàn)為稍低密度，與正常肝組織之間界限不清；行MRI平掃時，腫塊的T1WI圖像呈稍低信號、T2WI圖像呈稍高信號，未見明顯的病灶出血或壞死癥狀。動態(tài)增強時，13例行動態(tài)增強CT患者和8例行動態(tài)增強MRI患者動脈期病灶周邊出現(xiàn)線樣環(huán)狀強化，中心無明顯強化；門靜脈期和延遲期病灶呈漸進(jìn)性、填充式向心性強化，尤其在延遲期更為顯著。3討論

肝內(nèi)周圍型膽管細(xì)胞癌嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量，從病理上分型，IHPCC可以分為膽管內(nèi)型、膽管周圍浸潤型和腫塊型。其中，腫塊型是臨床最常見的類型，影像學(xué)上極易與肝內(nèi)其它占位性病變相混淆，術(shù)前誤診率較高，需要進(jìn)行準(zhǔn)確的鑒別診斷，從而指導(dǎo)臨床采取合適的治療手段。目前CT和MRI是診斷本病最常用和有效的診斷技術(shù)[2]。目前，肝內(nèi)周圍性腫塊型膽管細(xì)胞癌的發(fā)病機制還不甚清楚，其致病原因可能與膽道系統(tǒng)長期的慢性炎性刺激或者理化刺激有關(guān)[3]。

肝內(nèi)周圍性腫塊型膽管細(xì)胞癌的影像表現(xiàn)與病灶的病理密切相關(guān)，在CT或MRI影像上，病灶往往呈單發(fā)腫塊，只有少數(shù)病灶可見周圍的子灶，本研究中所有患者均呈單發(fā)腫塊。動態(tài)增強CT和MRI掃描后，肝內(nèi)周圍性腫塊型膽管細(xì)胞癌大部分病灶都具有一定的特征性，在動脈期病灶在CT或者M(jìn)RI圖像上呈邊緣線狀強化，通常不連續(xù)且中心不強化；這種強化特征和肝細(xì)胞癌及轉(zhuǎn)移瘤的對比劑快速進(jìn)入病變的強化特征不同，因而是他們之間的鑒別要點之一。在本研究中，CT和MRI在門靜脈期和延遲期病灶呈漸進(jìn)性、填充式向心性強化，這也是和其它腫瘤鑒別的主要依據(jù)。

綜上所述，動態(tài)增強CT和MRI檢查，能夠反映肝內(nèi)周圍性腫塊型膽管細(xì)胞癌的影像學(xué)特征，在該病的診斷中具有重要的臨床價值，值得推廣使用。參考文獻(xiàn)

[1]吳軼娜，格日麗，王小燕.MRI與CT增強掃描診斷肝細(xì)胞癌的臨床分析[J].醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志，2012，22（9）：1477-1480.

篇3

【摘要】目的：探討螺旋CT在診斷肝門部膽管細(xì)胞癌中的價值。 方法：回顧性分析21例肝門部膽管細(xì)胞癌的CT平掃和增強掃描的表現(xiàn)。重點觀察腫瘤的形態(tài)特征、肝內(nèi)膽管擴張程度、范圍、肝門部血管受侵及實質(zhì)臟器與周圍轉(zhuǎn)移的情況。結(jié)論：螺旋CT動脈期、門脈期、延遲期掃描不但有利于觀察肝門部膽管癌的強化和形態(tài)特點，更有利于觀察腫瘤沿周圍血管浸潤的情況和肝內(nèi)有無子灶的。

【關(guān)鍵詞】癌 肝門部膽管細(xì)胞 螺旋CT 延遲掃描重建

Intrahepatic bile duct carcinoma diagnostic CT

【Objective】 to study the spiral CT in diagnosis of liver bile duct carcinoma portal vein of value. Methods: a retrospective analysis of 21 cases of liver portal vein bile duct carcinoma CT scan and enhance the flat esau performance. Key observation tumor in the morphological characteristics, intrahepatic bile ducts dilation degree, limits, liver vascular invasion by the portal vein and parenchymal visceral with surrounding metastases. Conclusion: spiral CT arterial, portal period, delay period scanning is beneficial not only to observe liver lobectomy in strengthening and morphological characteristics, is more advantageous to observe the peripheral vascular tumor inolement situation and intrahepatic without son foci.

【key words】cancer Hepatic portal vein bile duct cells Spiral CT Delay scanning reconstruction

肝門部膽管細(xì)胞癌是肝臟的一種原發(fā)性腫瘤。起源于左右肝管匯合處膽管的上皮層，占膽管細(xì)胞癌的25％ ［1］。與肝癌不同，膽管細(xì)胞癌缺乏血液供應(yīng)，對化療、放療不敏感，手術(shù)治療是獲得長期生存的最重要因素。手術(shù)前能對肝門部病變作出明確診斷并清楚其對肝門部膽管、血管的侵犯程度，區(qū)域性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況，對手術(shù)方案的制定意義重大［2］。目前螺旋CT檢查是臨床上診斷本病最常用有效的手段。筆者收集了經(jīng)手術(shù)病理證實的，資料相對完整的21例肝門部膽管細(xì)胞癌，探討螺旋CT檢查在其診斷中的價值。資料與方法

1 臨床資料：本組21例均經(jīng)手術(shù)病理證實，男9例，女12例，年齡3673歲，其中大于50歲者18例，占85.7％。主要臨床癥狀是中上腹脹痛不適，進(jìn)行性加重，間歇性皮膚鞏膜黃染，黃疸，體重下降，脂肪瀉。AFP檢查均為陰性。有5例膽道結(jié)石手術(shù)史，其中2例此次仍見膽管結(jié)石。

2 CT掃描方法：21例中均做了CT平掃和增強。使用GE Lightspeed ultra 八排螺旋CT機。空腹于檢查前半小時口服清水800ML，一次屏氣下先完成全肝CT平掃，再行靜脈團(tuán)注法增強掃描。開始注射造影劑后25S為動脈期，70S為門靜脈期掃描。造影劑為優(yōu)維顯300MG/ML，100ML，層厚7MM，螺距1.25，速率3ML/S。掃描范圍上界自膈頂起始，下界止于L3椎體下緣（胰頭鉤突）。部分病例在病變部位又行延遲后局部放大薄層掃描，層厚為3MM。

3 觀察內(nèi)容：螺旋CT檢點觀察肝門部膽管細(xì)胞癌的形態(tài)特征，肝內(nèi)膽管擴張的范圍、程度，血管的侵犯情況，肝門部及十二指腸周圍區(qū)域及后腹膜淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝臟及遠(yuǎn)處臟器轉(zhuǎn)移情況。旨在探討螺旋CT對肝門部膽管細(xì)胞癌的臨床應(yīng)用價值和局限性。

結(jié)果

1 病理結(jié)果：本組21例，組織學(xué)分型：腺癌18例，鱗癌3例。左肝內(nèi)膽管近端6例，左側(cè)肝內(nèi)膽管擴張明顯；右肝內(nèi)膽管近端2例；肝總管13例，左右肝內(nèi)膽管均擴張，粗細(xì)不均，迂曲不規(guī)則。表現(xiàn)為腫塊樣改變11例，管壁增厚、管腔狹窄8例（如圖表一）。

（圖表一）

分類組織學(xué)分類區(qū)域分類病灶改變腺癌腺癌左肝內(nèi)膽管近端右肝內(nèi)膽管近端肝總管腫塊樣改變管壁增厚管腔狹窄

病例18例18例6例2例13例11例8例

2 CT表現(xiàn)：參照病理學(xué)分型，筆者根據(jù)CT上所見將病灶形態(tài)表現(xiàn)分為3種類型。腫塊型9例，表現(xiàn)為肝門部孤立的軟組織腫塊伴管壁增厚，遠(yuǎn)端膽管擴張；浸潤狹窄型5例，肝總管即左右肝內(nèi)膽管近端管壁不規(guī)則增厚，局限性管腔狹窄；腔內(nèi)生長型4例，表現(xiàn)為管腔內(nèi)的充盈缺損伴膽管擴張，有3例平掃和增強掃描未見明確腫塊。肝門部結(jié)構(gòu)不清、肝十二指腸胰頭區(qū)淋巴結(jié)影6例，后腹膜主動脈旁見淋巴結(jié)4例，膽系結(jié)石7例，肝臟見轉(zhuǎn)移灶5例，腹水征像4例，右側(cè)腎上腺見結(jié)節(jié)灶及胰頭部低密度影各一例。

CT平掃腫塊表現(xiàn)為略低密度，與肝門部門靜脈及相鄰肝組織分界不清，腫瘤為不規(guī)則分葉11例，呈圓形橢圓形7例，9例在擴張的膽管內(nèi)見到軟組織塊影。增強掃描8例腫瘤早期無明顯強化，7例表現(xiàn)為邊緣輕度強化，延遲后強化逐漸明顯，呈持續(xù)性。7例腫瘤區(qū)內(nèi)見線條狀強化影，2例呈均勻一致性強化，1例僅表現(xiàn)為早期的輕中度強化，延遲后無明顯強化（如圖表二）。

（圖表二）

討論

影像學(xué)檢查手段的應(yīng)用，特別是螺旋CT的無間隔掃描使得形態(tài)學(xué)特點也易于顯示，提高了術(shù)前診斷的準(zhǔn)確性，尤其對腫瘤形態(tài)、部位、大小，肝內(nèi)膽管有無擴張、擴張程度及局部淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等方面的顯示，占有了極大的優(yōu)勢，同時決定手術(shù)可行性或其它治療方法的運用，具有重要的決策意義。

肝門部膽管細(xì)胞癌的CT表現(xiàn)：由于肝總管和左右肝管直徑小，根據(jù)腫瘤所在的部位不同及病程的長短均可出現(xiàn)不同程度、不同范圍的膽管擴張。臨床上出現(xiàn)進(jìn)行性加重的黃疸。

CT對發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移的意義： CT對于肝臟的侵犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯示很清楚，而對于術(shù)中所見的肝十二指腸韌帶、臨近胃腸道的侵犯或小病灶，尤其是腹膜和網(wǎng)膜、盆腔的轉(zhuǎn)移，CT術(shù)前診斷則有一定的難度，病變的進(jìn)展往往比CT表現(xiàn)更進(jìn)一步。因此，我們應(yīng)注意從CT檢查結(jié)果預(yù)測實際病程的發(fā)展以提供給臨床醫(yī)生以便制定相應(yīng)的治療方案。膽管癌的肝浸潤較常見，據(jù)報道約見于30%的病例。

我們對腫瘤的局部侵犯將淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況進(jìn)行CT、手術(shù)及病理對照分析，發(fā)現(xiàn)不管是腫瘤的壁外侵犯或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，CT陽性檢出的特異性均較高；另一方面，CT雖對腫瘤壁外侵犯及淋巴結(jié)檢出的敏感性較低，無法確定腫瘤對肝內(nèi)膽管的浸潤范圍，但CT對腫瘤實質(zhì)性臟器的轉(zhuǎn)移、腫瘤局部侵犯及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的檢出具有高特異性，所以一旦CT發(fā)現(xiàn)腫瘤這些晚期征像，則陽性可信度極高。

此時常有利于制定合理的治療方案。

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篇4

福建醫(yī)科大學(xué)附屬漳州市醫(yī)院影像科，福建漳州363000

[摘要]目的探討肝細(xì)胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）并膽管癌栓的CT及MRI表現(xiàn)特點。方法回顧性分析2007年—2014年收治的48例經(jīng)手術(shù)證實為HCC并膽管癌栓患者的CT及MRI表現(xiàn)特點。結(jié)果45例術(shù)前CT或/和MRI增強掃描發(fā)現(xiàn)膽管癌栓，位于肝左葉16例、右葉20例、尾狀葉6例、累及左右肝6例，CT表現(xiàn)為膽管內(nèi)稍低或等密度軟組織影，增強掃描大部分呈“早進(jìn)早退”的肝細(xì)胞癌強化特征，部分不典型表現(xiàn)者呈中等度強化或輕度強化；MRI表現(xiàn)為肝內(nèi)或/和肝外膽管內(nèi)結(jié)節(jié)狀或團(tuán)塊狀稍長T1稍長T2信號影，DWI上信號不均勻增高，同反相位及STIR上信號未見明顯衰減，增強掃描為與原發(fā)灶“快進(jìn)快出”相似的強化特點。梗阻遠(yuǎn)端膽管膨脹性擴張；膽管壁無增厚或受侵表現(xiàn)且Satoh等2簡化臨床分型后，Ⅰ型左葉、右葉、尾狀葉、左右肝葉分別為6例、7例、2例、2例，Ⅱ型分別為8例、10例、3例、3例，Ⅲ型分別為1例、2例、0例、1例。結(jié)論肝細(xì)胞肝癌并膽管癌栓CT及MRI表現(xiàn)有一定的特征，可幫助術(shù)前明確診斷。

關(guān)鍵詞 肝細(xì)胞癌；膽管癌栓；CT；MRI

[中圖分類號]R735.7[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A[文章編號]1674-0742（2014）12（b）－0038-03

[作者簡介]黃睿剛（1971-），男，福建漳浦人，本科（學(xué)士），主治醫(yī)師，主要從事體部醫(yī)學(xué)影像診斷工作。

肝細(xì)胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）并膽管癌栓發(fā)生率1.9%~9%。該研究回顧性分析該院2007年—2014年經(jīng)手術(shù)確診的48例HCC并膽管癌栓的CT或/和MRI圖像，與病理對照，總結(jié)其影像學(xué)表現(xiàn)特點。現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

復(fù)習(xí)該院經(jīng)手術(shù)病理確診為HCC并膽道癌栓的48例患者CT或/和MRI影像資料，其中男40例，女8例，年齡37~81歲，平均年齡55歲。入院主訴黃疸12例，腹痛24例，體檢或意外發(fā)現(xiàn)肝臟占位12例。輔助檢查：總膽紅素升高36例；血清甲胎蛋白（AFP）升高>400μg/L38例，其中AFP>3000μg/L16例；所有患者HBsAg均陽性，γ-GT不同程度升高，伴慢性膽囊炎、肝硬化等。超聲檢查顯示肝占位或/和伴膽管占位，進(jìn)一步行CT或/和MRI檢查，發(fā)現(xiàn)肝內(nèi)及膽管占位病變；合并門靜脈癌栓14例，并膽管結(jié)石9例。

1.2手術(shù)及預(yù)后

3例手術(shù)時肝內(nèi)多發(fā)轉(zhuǎn)移灶，行膽囊切除+膽總管切開取癌栓+肝臟腫塊活檢術(shù)；其余45例行腫瘤責(zé)任半肝切除+膽管切開取癌栓+膽囊切除+T管引流術(shù)，所有病人均行淋巴結(jié)切除術(shù)。術(shù)后部分病人存活至今，生存3~60個月，平均20個月。

1.3檢查方法

19例術(shù)前行CT平掃及增強掃描，35例行MRI平掃及增強掃描。CT采用GELightSpeedVCT/discoveryCT750HD掃描儀，掃描參數(shù)：120kV，450mA，螺距0.984，轉(zhuǎn)速0.8sec，層厚5mm，層距5mm；掃描全肝，平掃+三期增強掃描；高壓注射器經(jīng)肘靜脈注入非離子型造影劑碘必樂（300mgI/mL）或碘海醇（350mgI/mL）80~100mL，速率3.0~4.0mL/s，于注射造影劑后25s、50~60s和90~120s分別行動脈期、門靜脈期和延時期（平衡期）掃描。MRI采用PHILIPSAchieva1.5超導(dǎo)磁共振掃描儀，相控陣體線圈，行橫斷面T1WI、T2WI、DWI（b=800）、T2-STIR、同反相位、冠狀面T2WI；肘靜脈注射釓對比劑GdDTPA，劑量0.1mmol/kg，行肝臟動態(tài)增強掃描。掃描序列參數(shù)：T1WI：TR400～600ms、TE15～30ms，T2WI：TR3000～4000ms、TE80～150ms，T2-STIR：TR1500～2000ms、TE60～90ms，矩陣256×256，層厚4.0～6.0mm，層距0.4～0.6mm。

1.4影像分析及病理

回顧CT或/和MRI影像，分析：（1）HCC位置、形態(tài)、大小、CT密度、MRI信號、邊緣、增強表現(xiàn)；（2）膽管癌栓位置、形態(tài)、大小、CT密度、MRI信號、邊緣、增強表現(xiàn)，與病理對照；（3）受累膽管的擴張情況、癌栓與膽管壁的關(guān)系；（4）有否合并門靜脈或/和肝靜脈癌栓、腹膜后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝外轉(zhuǎn)移等情況。

2結(jié)果

2.1HCC的CT和MRI表現(xiàn)

48例均在術(shù)前彩超、CT、MRI檢查中發(fā)現(xiàn)HCC病灶，位于肝左葉16例、右葉20例、尾狀葉6例、累及左右肝6例。肝臟腫瘤大小在35~150mm。30例肝臟輕或中度肝硬化。CT平掃腫塊與周圍正常肝實質(zhì)比較大部分呈低密度影，小部分為等密度影或稍高密度影。增強掃描大部分呈典型“早進(jìn)早退”表現(xiàn)，小部分不典型表現(xiàn)。腫塊大部分邊界清楚，部分邊界不清，部分可見“假包膜”。

肝內(nèi)HCC原發(fā)灶在MRI上表現(xiàn)為稍長T1稍長T2腫塊影，較大的病灶內(nèi)信號多不均勻，可見更長T1更長T2信號影，DWI上信號不均勻增高，部分病灶與周圍肝組織分界清晰，部分分界不清，部分可見“假包膜”征，表現(xiàn)為T1WI上細(xì)線狀低信號環(huán)，增強掃描延遲期可見“假包膜”強化。動態(tài)增強掃描病灶呈“快進(jìn)快出”表現(xiàn)，于動態(tài)增強早期即可出現(xiàn)明顯不均勻強化，相對肝實質(zhì)呈高信號，隨著時間延長，門脈期強化程度減低，相對周圍肝實質(zhì)呈低信號。

2.2膽管癌栓CT和MRI表現(xiàn)

Ueda1將膽管癌栓分為四型，Satoh等[2]簡化了臨床分型：I型，癌栓累及膽管一級分支，未到達(dá)左右肝管匯合部；Ⅱ型，癌栓延伸超過左右肝管匯合部；Ⅲ型，癌栓游離于原發(fā)腫瘤，在膽總管腔內(nèi)生長。Peng等[3]認(rèn)為Satoh分型簡單實用，更益于指導(dǎo)外科治療。該組48例中有45例膽管癌栓在CT或/和MRI圖像上清楚顯示，另3例患者影像檢查未發(fā)現(xiàn)膽管癌栓，而于術(shù)中發(fā)現(xiàn)膽管內(nèi)癌栓。見表1。

膽管癌栓表現(xiàn)為擴張的膽管內(nèi)軟組織腫塊，呈圓形或類圓形結(jié)節(jié)、短柱狀或樹杈狀鑄型，遠(yuǎn)段膽管擴張，癌栓遠(yuǎn)端呈杯口狀或不規(guī)則形。癌栓長度、直徑不等，該組病例最大者直徑約27mm。45例均見受累膽管擴大，該組病例最大膽管直徑約28mm。

與正常肝實質(zhì)比較，膽管癌栓CT平掃呈低或稍低密度影、少數(shù)為等密度影；增強掃描不均勻強化，部分均勻強化，大部分表現(xiàn)為“早進(jìn)早退”的特點。動脈期大部分顯著強化、呈高密度影，部分為等密度影或低密度影；門靜脈期大部分呈低密度影，部分為高密度影或等密度影；延時期均為低或稍低密度影。受累膽管壁邊緣清楚或較清楚，管壁無明顯增厚，增強掃描中等度強化，呈完整或不完整的稍高密度線樣影。膽管壁內(nèi)緣與膽管腔內(nèi)癌栓界限可清楚或不清，部分膽管壁內(nèi)緣與膽管腔內(nèi)癌栓間見特征性的裂隙狀邊緣清楚的低密度影（圖1）。膽管癌栓均未見向管壁外浸潤征象。癌栓遠(yuǎn)段膽管腔不同程度膨脹性擴張，呈樹枝狀或圓形低密度影，近端癌栓邊緣呈杯口狀（圖2）。

圖1：尾狀葉HCC并膽管癌栓，動脈期腫塊邊緣及肝總管癌栓（長箭）明顯強化，呈高密度影，可見光滑線狀肝總管管壁及癌栓與膽管壁間不規(guī)則膽汁間隙；門靜脈早顯，考慮為肝動脈門靜脈瘺，并可見強化的門靜脈癌栓（短箭）。

膽管癌栓MRI表現(xiàn)為沿膽管管腔生長的軟組織影，呈稍長T1稍長T2信號影，DWI上信號不均勻增高，同反相位及STIR上信號未見明顯衰減。遠(yuǎn)端擴張的膽管呈“軟藤樣”，膽管腔內(nèi)T1WI上明顯低信號，T2WI上為明顯高信號，類似“腦脊液”信號。T2WI上能夠清晰顯示膽管內(nèi)癌栓，表現(xiàn)為擴張的膽管內(nèi)明顯高信號突然中斷，被軟組織信號取代。動態(tài)增強掃描，膽管內(nèi)癌栓表現(xiàn)為與原發(fā)灶“快進(jìn)快出”相似的強化特點。癌栓周圍膽管壁在動態(tài)增強早期顯示較清晰，表現(xiàn)為細(xì)線狀、光滑清晰的高信號影，若癌栓與膽管壁之間存在不強化的膽汁間隙，則更有利于區(qū)分上述兩者。（圖3）

該組中4例Ⅲ型癌栓游離生長于膽總管末端，其余病例癌栓遠(yuǎn)端均見與肝臟腫瘤相連（圖4），并常延伸至肝外膽管。

T2WI上能夠清晰顯示膽管內(nèi)癌栓，表現(xiàn)為擴張的膽管內(nèi)明顯高信號突然中斷，被軟組織信號取代。筆者觀察這部分癌栓均為與HCC相連或靠近的病變，病理為HCC細(xì)胞癌巢，合并少量紅細(xì)胞、白細(xì)胞、壞死組織。

2.3影像表現(xiàn)與手術(shù)結(jié)果對照

48例HCC病理低分化30例，中等度分化18例。均行膽總管切開取癌栓術(shù)，術(shù)中癌栓分布與CT或/和MRI影像表現(xiàn)基本一致，其中1例術(shù)前顯示Ⅰ型癌栓及1例Ⅱ型癌栓病例術(shù)中于膽總管內(nèi)探及癌栓。3例術(shù)前影像未見明顯膽管癌栓患者，術(shù)中發(fā)現(xiàn)2例Ⅰ型癌栓及1例Ⅲ型。手術(shù)標(biāo)本膽管癌栓呈柱狀或條索狀，淺黑色或棕褐色，或血塊中見癌組織；膽管癌栓結(jié)構(gòu)疏松、水腫，見多量壞死組織，部分可見充血、急慢性炎細(xì)胞浸潤，或伴有結(jié)石。

2.4其他情況

14例門靜脈肝段或肝葉分支內(nèi)見癌栓，其余病例均未見合并門靜脈癌栓，部分病例可見近肝門部門靜脈受擴大的相鄰膽管壓迫變形。所有病例肝靜脈均未見癌栓。9例為肝臟腫瘤直接浸潤肝管致癌栓形成并合并膽總管結(jié)石。所有病例均行淋巴結(jié)切除，部分病例按肝門部膽管癌手術(shù)方式行淋巴結(jié)清掃，均未發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。48例術(shù)前檢查均未發(fā)現(xiàn)肝外轉(zhuǎn)移病灶。

3討論

由以上結(jié)果可知，45例術(shù)前CT或/和MRI增強掃描發(fā)現(xiàn)膽管癌栓，位于肝左葉16例、右葉20例、尾狀葉6例、累及左右肝6例，且Satoh等2簡化臨床分型后，Ⅰ型左葉、右葉、尾狀葉、左右肝葉分別為6例、7例、2例、2例，Ⅱ型分別為8例、10例、3例、3例，Ⅲ型分別為1例、2例、0例、1例。該組48例中45例膽管癌栓在CT或/和MRI圖像上清楚顯示，另3例患者影像檢查未發(fā)現(xiàn)膽管癌栓，而于術(shù)中發(fā)現(xiàn)膽管內(nèi)癌栓。以上結(jié)果均與曾弘，文劍明，張銳，等[8]在關(guān)于肝細(xì)胞癌膽管癌栓的病理學(xué)特點及其對手術(shù)治療預(yù)后的影響中所研究的結(jié)果相一致，具有臨床意義，而探究其之間的關(guān)系，具體如下。

3.1膽管癌栓與腫瘤的關(guān)系

膽管癌栓形成的機制可能是：（1）腫瘤直接侵入薄壁的肝內(nèi)膽管；（2）腫瘤先侵入門靜脈及淋巴管，再侵入膽管；（3）門靜脈癌栓侵入鄰近的膽管；（4）腫瘤經(jīng)神經(jīng)鞘間隙侵入膽管；（5）腫瘤先侵入膽管壁上的滋養(yǎng)血管，再穿破膽管上皮，進(jìn)入膽管腔內(nèi)。該組中4例Ⅲ型癌栓游離生長于膽總管末端，其余病例癌栓遠(yuǎn)端均見與肝臟腫瘤相連，并常延伸至肝外膽管，該研究認(rèn)為這可能是膽管癌栓的一個特征性表現(xiàn)，這也與癌栓形成的機制相符。該類HCC各肝段均有發(fā)生，右肝病例稍多，但仍需較大數(shù)量的病例統(tǒng)計驗證。邱智泉[4]等認(rèn)為肝內(nèi)腫瘤較小可能是該種類型HCC的一個特征，該組病例無明顯分布特征，可能與病例數(shù)較少有關(guān)。癌栓累及的肝段膽管與腫瘤的發(fā)生部位肝段一致，但腫瘤與肝門部的距離遠(yuǎn)近未顯示與癌栓的發(fā)生明顯相關(guān)。桂文波[5]等認(rèn)為膽管癌栓不是原發(fā)性肝癌的晚期表現(xiàn)，積極的外科治療可獲得較滿意的療效。胡曉燕[6]等認(rèn)為對于原發(fā)性肝癌患者、即使出現(xiàn)黃疸、輔助檢查膽管內(nèi)癌栓形成，若相關(guān)檢查未發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移征象，只要能耐受手術(shù)，積極行根治性手術(shù)治療仍是有意義的治療措施并取得較好的效果。

3.2膽管癌栓的CT和MRI診斷

膽管癌栓的CT和MRI表現(xiàn)有一定的特征性。

直接征象：（1）肝臟腫塊，增強掃描呈典型或不典型強化。（2）膽管癌栓表現(xiàn)為沿膽管管腔生長的軟組織影[7]。CT平掃膽管內(nèi)稍低或等密度影呈結(jié)節(jié)狀、柱狀、條索狀或不規(guī)則鑄型；增強掃描部分病灶呈動脈期高密度、門脈期及平衡期低密度的典型“早進(jìn)早退”表現(xiàn)。MRI呈稍長T1稍長T2信號影，DWI上信號不均勻增高，同反相位及STIR上信號未見明顯衰減。T2WI上能夠清晰顯示膽管內(nèi)癌栓，表現(xiàn)為擴張的膽管內(nèi)明顯高信號突然中斷，被軟組織信號取代。筆者觀察這部分癌栓均為與HCC相連或靠近的病變，病理為HCC細(xì)胞癌巢，合并少量紅細(xì)胞、白細(xì)胞、壞死組織，這類病例提示癌栓與HCC的組織同源性；另外部分病灶輕度強化或不強化，該部分膽管癌栓常遠(yuǎn)離HCC，病理以血栓或壞死組織為主，內(nèi)含腫瘤細(xì)胞。（3）膽管壁無明顯增厚或僅有輕微增厚，表現(xiàn)為完整或不完整的線樣影，可見輕度強化，部分癌栓與膽管壁界限不清，部分癌栓與膽管內(nèi)緣緊貼而界限可辨認(rèn)或較清楚。

間接征象：（1）癌栓遠(yuǎn)端膽管擴張呈“軟藤狀”，梗阻端呈杯口狀或不規(guī)則形，擴張的膽管壁光滑；CT上癌栓與膽管壁間可見邊緣清楚的不規(guī)則形低密度裂隙，暨膽汁間隙，該間隙具有一定的特征性，是膽管癌栓與膽管癌的鑒別點之一[9]。MRI上膽管腔內(nèi)T1WI上為明顯低信號，T2WI上為明顯高信號，類似“腦脊液”信號，若癌栓與膽管壁之間存在不強化的膽汁間隙，則更有利于區(qū)分上述兩者。（2）膽管癌栓較大時可壓迫臨近門靜脈，表現(xiàn)為門靜脈變形、局限性變窄，合并門靜脈癌栓時可見門靜脈充盈缺損。

其他情況：（1）SatohⅡ型及Ⅲ型患者常見梗阻性黃疸，血總膽紅素升高；（2）肝癌患者常有乙型肝炎、肝硬化、AFP升高等相關(guān)因素。

3.3膽管癌栓的鑒別診斷

主要是HCC并膽管癌栓與膽管細(xì)胞癌的鑒別，HCC常有肝硬化、肝實質(zhì)內(nèi)腫塊、膽管內(nèi)邊界清楚的軟組織影；而典型的膽管癌動脈期及門脈期呈低密度，延遲掃描可輕度或明顯強化[10-11]。此外膽管癌栓與膽管壁結(jié)合疏松或可見低密度膽汁間隙的特征，與膽管癌腫瘤與膽管壁結(jié)合緊致、管周浸潤生長亦是鑒別特點之一。另外膽管癌栓還需與膽管結(jié)石、膽道出血、肝門部淋巴結(jié)腫大等鑒別，一般不難。

肝細(xì)胞肝癌并膽管癌栓的這些CT和MRI特征性表現(xiàn)，術(shù)前檢查可幫助明確診斷，并區(qū)分黃疸型肝癌的黃疸原因，對提高術(shù)前綜合判斷、指導(dǎo)制定及實行針對性手術(shù)計劃具有重要的意義。

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篇5

【摘要】 目的：探討TGF-β1與膽囊癌細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的關(guān)系，分析其在膽囊癌發(fā)病中的機理，評價其對膽囊癌預(yù)后的價值。方法：用免疫組化對原發(fā)性膽囊癌及膽囊腺瘤、慢性膽囊炎行TGF-β1、PCNA、Cyclin E檢測，對膽囊癌患者進(jìn)行隨訪。結(jié)果：膽囊癌TGF-β1陽性表達(dá)率57.14%，顯著高于膽囊腺瘤、膽囊炎（P均

【關(guān)鍵詞】 膽囊癌；轉(zhuǎn)化生長因子β1；細(xì)胞周期；細(xì)胞增殖

[Abstract] Objective: To study the relationship between TGF-β1 and cell proliferation and cell cycle in gallbladder carcinoma，to disclose the mechanism of TGF-β1 in the gallbladder carcinogenesis，and to evaluate the value of it’s prognosis. Methods: Formalin fixed and paraffin embedded sections from gallbladder carcinomas were immunostained with TGF-β1，PCNA and Cyclin E antibodies. Gallbladder adenoma and chronic cholecystitis were collected as non-malignant controls. Results: Positive immunostaining rate of TGF-β1 was 57.14%，which was significantly higher in gallbladder carcinomas than that in gallbladder adenomas and chronic cholecystitis （P

[Key words] Gallbladder carcinoma；Tansforming growth factor-β1；Cell cycle；Cell proliferation

轉(zhuǎn)化生長因子（tansforming growth factor-β1，TGF-β1）是一類具有多種生物學(xué)功能的多肽類生長因子，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、分化和免疫功能，可抑制多種上皮細(xì)胞的生長[1]。盡管多種腫瘤中可見TGF-β1過表達(dá)[1-2]，但膽囊癌中卻鮮見報道。本實驗檢測TGF-β1、增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）、cyclin E在原發(fā)性膽囊癌及膽囊腺瘤、慢性膽囊炎中的表達(dá)情況，探討TGF-β1與細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的關(guān)系，同時分析了TGF-β1在膽囊癌預(yù)后中的價值。

1 材料和方法

1.1 材料 收集常州市第三人民醫(yī)院和南通大學(xué)附屬醫(yī)院原發(fā)性膽囊癌35例，膽囊腺瘤10例，慢性膽囊炎10例。所有標(biāo)本經(jīng)10％甲醛固定，石蠟包埋，均獲常規(guī)病理證實。35例原發(fā)性膽囊癌中，男14例，女21例，平均年齡57.94±4.61歲，其中腺癌32例，腺鱗癌2例，鱗癌1例。35例原發(fā)性膽囊癌患者進(jìn)行了隨訪。

1.2 方法 第一抗體為鼠抗PCNA單克隆抗體（PC10）（Zymed），兔抗cyclin E多克隆抗體，兔抗TGF-β1多克隆抗體（Santa Cruz）。所有組織塊均重新制備4 μm連續(xù)切片備用，具體步驟按說明書進(jìn)行。每批染色過程均設(shè)已知陽性對照及PBS代替一抗的陰性對照。結(jié)果判斷：PCNA、cyclin E以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色至深棕色顆粒為陽性，TGF-β1以細(xì)胞漿或細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色到深棕色顆粒為陽性。選擇PCNA標(biāo)記良好的區(qū)域在400倍高倍顯微鏡下任意選5個視野，計數(shù)超過200個腫瘤細(xì)胞，再換算為百分比，即PCNA LI；cyclin E判斷標(biāo)準(zhǔn)：陰性（-）：陽性細(xì)胞率5%；TGF-β1判斷標(biāo)準(zhǔn)，陰性(-)：陽性細(xì)胞率10%。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用Stata7.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，計量資料用x±s表示，兩組間均數(shù)采用t檢驗，多組間均數(shù)比較采用方差分析；計數(shù)資料采用χ2檢驗。患者生存率分析采用Kaplan—Meier法，logrank分析檢驗組間生存率差異，等級相關(guān)用Spearman法，采用t檢驗。

2 結(jié)

果

2.1 TGF-β1在膽囊良惡性疾病中的表達(dá) TGF-β1染色陽性主要定位于細(xì)胞漿或細(xì)胞膜，呈棕黃色細(xì)顆粒狀（見圖1，2）。膽囊癌TGF-β1陽性率為57.14%，顯著高于膽囊腺瘤和膽囊炎（20%、10%，P均

2.2 TGF-β1與膽囊癌臨床病理特征的關(guān)系 TGF-β1陽性表達(dá)率在Nevin分期中差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P

2.3 TGF-β1與膽囊癌預(yù)后的關(guān)系 35例隨訪資料，2例失隨訪，3例仍存活，30例在隨訪期內(nèi)死亡，平均隨訪時間19.23±17.63個月。TGF-β1陽性組生存時間11.65±12.55個月，中位生存期9個月；陰性組生存時間29.33±18.69月，中位生存期27個月，TGF-β1表達(dá)陽性組預(yù)后要比陰性組差（P

2.4 TGF-β1與膽囊癌細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的關(guān)系 見表1。膽囊癌PCNA LI為43.84%±18.53%，cyclin E陽性率為48.57%。TGF-β1陽性表達(dá)率與PCNA LI和cyclin E的陽性率均呈正相關(guān)（rs=0.5232，P

3 討

論

體內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)TGF-β1對上皮細(xì)胞生長有潛在抑制作用，但許多腫瘤中TGF-β1高表達(dá)與癌細(xì)胞顯著增加的生長率之間的矛盾卻提示這些腫瘤細(xì)胞已失去了TGF-β1的生長抑制調(diào)控，甚至有作者推測TGF-β1還促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長[1-2]。Tsushima等[3]在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者中發(fā)現(xiàn)，78％的術(shù)后TGF-β1血清水平高于臨界值。本組研究發(fā)現(xiàn)，膽囊癌中TGF-β1的陽性表達(dá)率明顯高于膽囊良性疾病(P

PCNA是真核細(xì)胞DNA合成所必須的一種核蛋白，與細(xì)胞增殖周期有關(guān)，反映了細(xì)胞增殖過程中DNA復(fù)制和細(xì)胞增殖活性，對判斷腫瘤生物學(xué)行為有很高價值。本實驗發(fā)現(xiàn)PCNA LI與膽囊癌分化程度、Nevin分期、淋巴結(jié)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與否均相關(guān)，可反映膽囊癌的生物學(xué)特征。惡性腫瘤的本質(zhì)在于細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控，細(xì)胞呈現(xiàn)無限制、自由的增殖和分裂， Cyclin E表達(dá)在G1/S轉(zhuǎn)換時達(dá)高峰，很可能在細(xì)胞分裂周期中起中心控制作用，加速細(xì)胞進(jìn)入S期。本實驗結(jié)果表明cyclin E與膽囊癌分化程度、淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與否呈正相關(guān)。cyclin E陽性表達(dá)率與PCNA LI呈正相關(guān)(rs=0.4364，P

TGF-β1和腫瘤的預(yù)后密切相關(guān)。Tsushima等[3]用Cox多因素風(fēng)險回歸分析表明術(shù)后TGF-β1血清水平是結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的重要預(yù)測因子。術(shù)后兩周檢測TGF-β1血清水平可以預(yù)測結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移。在乳腺癌中高水平血清TGF-β1的患者預(yù)后很差[9]。我們研究發(fā)現(xiàn)TGF-β1表達(dá)陽性者預(yù)后要比表達(dá)陰性者差好，這表明TGF-β1在膽囊癌中是良好的預(yù)后因子。

TGF-β1是反映細(xì)胞增殖狀態(tài)的良好指標(biāo)。膽囊癌患者中腫瘤細(xì)胞逃逸TGF-β1的生長抑制作用，以及TGF-β1的促腫瘤形成作用，可能是膽囊癌變過程中的重要機制，TGF-β1是判斷膽囊癌預(yù)后的良好指標(biāo)，對TGF-β1表達(dá)陽性者，揭示其預(yù)后差，應(yīng)加強綜合治療和密切隨訪。

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篇6

【關(guān)鍵詞】 細(xì)胞周期蛋白D1

【摘要】 目的 研究人食管癌中原癌基因CCND1蛋白產(chǎn)物cyclin D1的表達(dá)和臨床意義。方法 用免疫組織化學(xué)方法（SP）檢測了45例食管鱗癌，15例癌旁組織和15例正常粘膜組織中cyclin D1蛋白的表達(dá)。結(jié)果 45例食管鱗癌cyclin D1蛋白表達(dá)陽性率57.8%，明顯高于癌旁組織（20%）和食管粘膜組織（13.3%），侵犯粘膜與侵及外膜組相比，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組相比差異均有顯著性（P<0.05）。結(jié)論 cyclin D1蛋白表達(dá)可以預(yù)測食管癌的預(yù)后，有可能作為食管癌臨床分期的參考指標(biāo)。

關(guān)鍵詞 細(xì)胞周期蛋白D1 基因表達(dá) 食管腫瘤

【Abstract】 Objective To study the expression and significance of cyclin D1protein in human squamous carˉcinoma of esophagus.Methods Using sterptavidin peroxidase（SP）method，we detected the expression of cyclin D1protein in 45 squamous carcinoma of esophagus.15Adjacent non-tumorous esophageal specimens and15normal squamous tissues.Results The positive rate of cyclin D1protein in squamous carcinoma of esophagus was57.8%（26/45），much greater than20%（3/15）in adjacent non-tumorous esophageal specimens and13.3%（2/15）in normal squamous mucosa.There was a significant difference of cyclin D1protein between the invasioning mucosa groups and the invasioning advenitia groups，also it correlated with lymph node metastases（P<0.05）.Conclusion The expression of cyclin D1protein would be play an important role in the development of human esophageal cancers，so could suggest the prognostic for cancer of esophagus.

Key words cyclin D1protein expression carcinoma of esophagus

細(xì)胞周期素D（cyclin D）是近幾年才被確定的原癌基因，它通過促進(jìn)G 1 S期的轉(zhuǎn)變而促進(jìn)細(xì)胞周期，起到調(diào)節(jié)組織細(xì)胞增殖的作用，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)cyclin D1基因在多種腫瘤細(xì)胞中存在擴增和過度表達(dá)，我們應(yīng)用S-P免疫組織化學(xué)方法研究細(xì)胞周期蛋白D1在45例人食管鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)，并與癌旁食管組織及正常食管粘膜組織對比，探討細(xì)胞周期蛋白D1在腫瘤發(fā)生中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 45例食管癌組織和15例癌旁食管組織（距離腫瘤超過5cm）均取自第二軍醫(yī)大學(xué)附屬醫(yī)院胸心外科經(jīng)手術(shù)切除的食管標(biāo)本，15例正常食管組織取自湖北省宜昌市第一人民醫(yī)院胃鏡室纖維胃鏡活檢標(biāo)本。45例食管癌中，腫瘤浸潤粘膜層7例，浸潤肌層27例，侵犯全層11例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例。男女之比4.6:1，年齡41～80歲，平均57.6歲。

1.2 方法 標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋，4μm切片。采用免疫組織化學(xué)SP法檢測。鼠抗人細(xì)胞周期蛋白D1單克隆抗體（DCS/6）及加強型SP試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)公司，染色步驟按說明書進(jìn)行，以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照。

1.3 免疫組化結(jié)果判定 cyclin D1染色陽性為細(xì)胞核和（或）細(xì)胞質(zhì)呈不均勻棕黃色細(xì)顆粒狀或棕褐色團(tuán)塊狀。按染色強弱分為-（陰性）、±（弱陽性）、+（陽性）、++（強陽性）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用χ 2 檢驗。

2 結(jié)果

2.1 cyclin D1蛋白的表達(dá) 45例食管鱗癌cyclin D1蛋白陽性表達(dá)為26例，陽性表達(dá)率為57.8%;15例癌旁組織cyˉclin D1蛋白陽性表達(dá)為3例，陽性表達(dá)率為20%;15例正常粘膜cyclin D1蛋白陽性表達(dá)為2例，陽性表達(dá)率為13.3%。食管鱗癌cyclin D1蛋白的表達(dá)明顯高于癌旁組織和正常食管組織，差異有顯著性（P<0.05），染色強度食管鱗癌細(xì)胞高于正常組織和癌旁組織。正常粘膜與食管鱗癌相比，χ 2 =8.93，P<0.01;癌旁組織與食管鱗癌相比，χ 2=6.43，P<0.05。

2.2 cyclin D1蛋白的表達(dá)和腫瘤侵犯深度的關(guān)系 45例食管鱗癌按腫瘤侵犯的深度分為粘膜層7例，肌層27例，外膜層（全層）11例，cyclin D1蛋白的陽性表達(dá)率分別為28.6%、55.6%、81.2%，cyclin D1蛋白在腫瘤侵犯粘膜層中的陽性表達(dá)率明顯低于侵犯全層組，差異有顯著性（P<0.05）。腫瘤侵犯外膜與粘膜層相比，χ 2 =5.1，P<0.05。

2.3 cyclin D1蛋白和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況的關(guān)系 45例食管鱗癌按淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況分為有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移19例，cyclin D1蛋白的陽性表達(dá)率分別為69.2%，31.6%，cyclin D1蛋白在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中的陽性表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，差異有顯著性（P<0.05）。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與無淋巴轉(zhuǎn)移相比，χ 2 =6.25，P<0.05。

3 討論

細(xì)胞周期蛋白D1是由位于人類第11號染色體短臂11q13上的CCND1基因編碼，由292個氨基酸組成，分子量為34kD，其中56-114位氨基酸序列為其結(jié)構(gòu)的主要部分，稱為周期素盒子（cyclin box）。Sicinski ［1］ 的研究認(rèn)為cyclin D1是大多數(shù)組織增殖所必需的。其作用機理目前認(rèn)為與腫瘤抑制性蛋白Rb蛋白有關(guān)。cyclin D1與細(xì)胞周期依賴性激酶結(jié)合后可以使Rb蛋白磷酸化，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子E 2 F解離發(fā)揮效應(yīng)，從而促進(jìn)細(xì)胞周期。

目前的研究發(fā)現(xiàn)在食管癌發(fā)生、演變過程中存在著一系列的遺傳改變。Jiang ［2］ 在20%的人食管鱗癌中發(fā)現(xiàn)了cyclin D1和hst-1基因的聯(lián)合擴增，這個發(fā)現(xiàn)第一次提供了cyclin D1基因在人類食管癌中擴增的依據(jù)。隨后Tahara ［3］ 、kiriu ［4］ 等也證實了cyclin D1基因在人食管癌中的擴增，同時伴隨著cyclin D1蛋白的過度表達(dá)。這些都揭示了cyclin D1基因的擴增和過度表達(dá)是人類惡性食管癌的一個好的生物學(xué)標(biāo)記，cyclin D1蛋白的檢測可以作為食管癌的輔助診斷。關(guān)于cyclin D1與食管癌預(yù)后的關(guān)系Tahara的研究認(rèn)為cyclin D1基因的擴增與食管癌的發(fā)生、發(fā)展，腫瘤的侵犯深度和遠(yuǎn)處的轉(zhuǎn)移密切相關(guān);國內(nèi)祝淑釵［5］ 等的研究也指出cyclin D1蛋白的表達(dá)和不表達(dá)相比，生存率差異有顯著性。這些結(jié)果提示cyclin D1蛋白的表達(dá)可以預(yù)測食管癌的預(yù)后，有可能作為食管癌臨床分期的參考指標(biāo)。

我們通過單克隆抗體免疫組織化學(xué)方法研究結(jié)果表明，在食管鱗癌組織中cyclin D1蛋白的陽性表達(dá)為57.8%，明顯高于正常食管粘膜組織（13.3%），表明人類食管癌的發(fā)生與細(xì)胞周期蛋白D1的存在密切相關(guān)，亦說明細(xì)胞周期蛋白D1可以作為食管癌診斷的一個分子標(biāo)記物。食管癌旁組織中cyclin D1蛋白陽性表達(dá)率為20%，明顯低于食 管癌組織（57.8%），但與正常食管粘膜組織（13.3%）相比差異無顯著性，說明距離腫瘤5cm以上的食管癌旁組織可以看作正常食管粘膜組織，這與腫瘤手術(shù)切除原則是相吻合的。本研究中正常食管粘膜組織和癌旁組織中有3例出現(xiàn)細(xì)胞周期蛋白D1的弱陽性，2例陽性，可能原因:（1）在正常組織的上皮增殖區(qū)存在著極低水平的細(xì)胞周期蛋白D1;（2）炎性因子的刺激可能使細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)略有增高;（3）抗原的修復(fù)也可能造成一定的假陽性。

臨床資料分析發(fā)現(xiàn)，食管癌侵犯全層組中cyclin D1蛋白的陽性表達(dá)率為81.2%，明顯高于腫瘤侵犯粘膜組（28.6%）;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組cyclin D1蛋白陽性表達(dá)率為69.2%，明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（31.2%），這些結(jié)果均提示晚期食管癌細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)明顯高于早期食管癌，因此，細(xì)胞周期蛋白D1是食管癌預(yù)后的重要標(biāo)志物。

近幾年的研究充分顯示細(xì)胞周期與細(xì)胞癌變不是相互獨立的事件。在人類食管癌中發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞周期各個階段的調(diào)節(jié)因子都有不同程度的異常，cyclin D1基因（CCND1）就是這樣一個已明確的原癌基因。由于細(xì)胞癌變是基因連續(xù)突變結(jié)果，因此細(xì)胞周期相關(guān)癌基因（如cyclin D1、P16、Rb）與細(xì)胞增殖相關(guān)基因（如ras、c-myc、c-fos）在食管癌中是否存在協(xié)同作用，其確切機制如何有待進(jìn)一步的研究。

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篇7

[關(guān)鍵詞] 超聲；膽管癌；診斷；鑒別診斷

[中圖分類號] R735.8 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-0742（2013）07（c）-0173-02

在對膽管癌患者進(jìn)行疾病診斷時，應(yīng)及早的對患者采取較為準(zhǔn)確、敏感的方式，從而有助于患者的疾病治療以及預(yù)后情況改善，而超聲對于疾病診斷有一定的積極臨床意義。該研究就此對該院2010年8月―2011年8月期間收治的60例膽管癌患者應(yīng)用，超聲在膽管癌診斷及鑒別診斷中的臨床價值進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取膽管癌患者60例，其中男性膽管癌患者有35例，占58.33%，女性膽管癌患者有25例，占41.67%，患者的年齡段在43～80歲之間，平均年齡為（56.7±2.5）歲。其中臨床癥狀出現(xiàn)上腹部不適以及疼痛情況的膽管癌患者有24例，占40.00%，出現(xiàn)乏力以及消瘦情況的患者有14例，占23.33%，出現(xiàn)惡心以及嘔吐癥狀的膽管癌患者有11例，占18.33%，出現(xiàn)鞏膜以及皮膚黃染的膽管癌患者有30例，占50.00%，上腹部觸及包塊的患者有10例，占16.67%，腹水患者有8例，占13.33%，肝硬化患者有5例，占8.33%，肝功能異常的患者有9例，占15.00%。

1.2 方法

對患者進(jìn)行彩色多普勒超聲檢查，對患者的影像學(xué)特征進(jìn)行分析，并且將其與患者的病理結(jié)果進(jìn)行比較，從而對超聲在膽管癌診斷及鑒別診斷中的臨床價值進(jìn)行分析。其中采取Siemens Sequoia 512彩色多普勒超聲診斷儀，其中探頭的頻率為2.5～5.0MHz之間。而膽管癌患者在進(jìn)行超聲檢查前應(yīng)禁食8～12 h，并且對患者進(jìn)行常規(guī)的膽以及肝系統(tǒng)的掃查，并且對患者的病灶邊緣形態(tài)以及回升特點等進(jìn)行重點觀察，同時對于患者膽道的管壁、走形、官腔以及周圍組織回聲等進(jìn)行觀察，并且對于患者膽管梗阻平面以及梗阻原因進(jìn)行一定的確定。在對膽管癌患者進(jìn)行超聲檢查后對患者進(jìn)行經(jīng)內(nèi)鏡逆行胰膽管造影（即ERCP）檢查，從而明確患者的膽道梗阻部位以及梗阻原因。將患者的影像學(xué)檢查與患者的病理結(jié)果進(jìn)行比較分析。

1.3 統(tǒng)計方法

將所得到的數(shù)據(jù)資料輸入SPSS 18.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。

2 結(jié)果

由本次試驗結(jié)果可知，超聲診斷結(jié)果中有13例患者為膽管細(xì)胞癌，6例患者為肝細(xì)胞癌，3例患者為導(dǎo)尿管結(jié)石合并膽管炎，1例患者為肝膿腫。而其中膽管細(xì)胞癌患者中有8例患者的影像表現(xiàn)為形狀不規(guī)則，團(tuán)塊狀不均勻的回聲，并且邊界不清晰，患者病灶內(nèi)沒有出現(xiàn)較為明確的膽管結(jié)構(gòu)，鄰近病灶的肝實質(zhì)有不同程度的肝擴張。而被診斷為肝細(xì)胞癌的患者的影像表現(xiàn)為病灶內(nèi)部以及病灶周圍未出現(xiàn)較為明確的膽管結(jié)構(gòu)，不均勻回聲腫塊等。而3例被診斷為膽管結(jié)石合并膽管炎的患者的影像表現(xiàn)為出現(xiàn)強回聲結(jié)石伴有一定的后方聲影，且患者的鄰近膽管粗細(xì)不均勻，并沒有出現(xiàn)較為明確的膽管壁增厚情況。而被誤診為肝膿腫的膽管癌患者則腫塊的征象不明顯，且可以看見大片狀的液性暗區(qū)。

經(jīng)超聲檢查可知為肝外膽管癌的患者有31例，膽管炎患者3例，胰腺癌患者1例，膽固醇結(jié)石患者1例，出現(xiàn)漏診患者1例。將其與患者的病理結(jié)果進(jìn)行比較，可知肝外膽管癌的超聲診斷準(zhǔn)確率為83.78%。而肝外膽管癌的超聲直接影像征象可知，膽管浸潤性患者的影像表現(xiàn)為錐狀或鼠尾狀狹窄，或膽管移行性狹窄，膽管壁出現(xiàn)不規(guī)則的增厚情況，伴有一定的近側(cè)膽管擴張情況。而膽管腔內(nèi)型的影像表現(xiàn)為膽管中重度擴張，且腔內(nèi)出現(xiàn)結(jié)節(jié)狀或者息肉狀的異?；芈暻闆r，部分患者會出現(xiàn)點狀血流信號。而腫塊型患者的影像表現(xiàn)為壺腹部、肝門部出現(xiàn)強弱不等的團(tuán)塊狀回聲情況，且邊界較清除，鄰近患者膽管出現(xiàn)膽管擴張情況，并且出現(xiàn)管壁不同程度的增厚。

由表1中數(shù)據(jù)可知，肝內(nèi)膽管癌疾病的超聲診斷準(zhǔn)確率為56.52%，而肝外膽管癌的超聲診斷準(zhǔn)確率為83.78%，可知超聲在膽管癌診斷及鑒別診斷有一定的積極臨床意義。

表1 膽管癌患者的超聲診斷準(zhǔn)確率情況（%）

3 討論

膽管癌作為起源于人體膽管上皮細(xì)胞的惡性腫瘤疾病之一，疾病可發(fā)生于患者膽道系統(tǒng)的任一部位，其中發(fā)病部位包括肝門部膽管、肝內(nèi)膽管、壺腹部以及肝總管等[1]。肝管癌患者中肝門部膽管癌、肝內(nèi)膽管癌由于缺乏較為典型的體征以及臨床癥狀，易被伴發(fā)的膽石癥、膽管炎以及肝膿腫的癥狀的臨床癥狀所掩蓋，從而出現(xiàn)臨床漏診或誤診情況[2]。因此，在對膽管癌患者進(jìn)行疾病診斷時有一定的難度，應(yīng)采取較為準(zhǔn)確且敏感的檢查方式及早的對膽管癌患者進(jìn)行疾病診斷，從而及時的采取相應(yīng)的疾病治療以及預(yù)后處理。隨著現(xiàn)今醫(yī)療器械的飛速發(fā)展，在對膽管癌患者進(jìn)行疾病診斷時，采取多普勒超聲儀對于患者的疾病診斷有一定的積極臨床意義[3]。

肝內(nèi)膽管癌患者的超聲影像圖沒有較為明確的特征，其影像表現(xiàn)多表現(xiàn)為肝內(nèi)膽管局限性狹窄或浸潤性生長腫塊，但是超聲診斷常需要接觸伴隨征象，如肝內(nèi)膽管結(jié)石以及周圍膽管擴張等[4]。而其中常被誤診為肝細(xì)胞癌的患者的超聲影像表現(xiàn)為其腫塊周圍以及其內(nèi)部均沒有出現(xiàn)較為明確的膽管擴張情況，并且由于膽管細(xì)胞癌為一種乏血供腫瘤，不能夠看到較為明顯的血流信號[5]。被誤診為肝膿腫以及膽管炎的原因一定程度上與其超聲檢查對于伴有一定膽管炎、肝內(nèi)膽管結(jié)石以及肝膿腫的膽管癌診斷特異性較低有關(guān)。

肝外但管作為發(fā)生于患者肝外膽管上皮細(xì)胞的惡性腫瘤疾病，可發(fā)生于患者的肝外膽管任一部位[6]。而肝外膽管癌的生長方式為結(jié)節(jié)狀浸潤管壁或彌漫性浸潤管壁以及結(jié)節(jié)狀或息肉狀腫塊突入官腔兩種，其超聲影像特征為無明顯的軟組織腫塊，擴張膽管遠(yuǎn)端或可以臟膽管遠(yuǎn)端軟組織腫塊突然出現(xiàn)移行性狹窄或截斷[7]。

由本次試驗所得相關(guān)的數(shù)據(jù)資料可以得知，肝內(nèi)膽管癌疾病的超聲診斷準(zhǔn)確率為56.52%，而肝外膽管癌的超聲診斷準(zhǔn)確率為83.78%，可知超聲在膽管癌診斷及鑒別診斷有一定的積極臨床意義。

綜上所述，在對膽管癌患者進(jìn)行疾病診斷時，采取超聲檢查，對于患者的疾病診斷以及鑒別診斷有一定的積極意義，值得推廣使用。

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篇8

【關(guān)鍵詞】 蛋白激酶

關(guān)鍵詞: 蛋白激酶C;同工酶;胃癌;多藥耐藥

摘 要:目的 觀察傳統(tǒng)型蛋白激酶C（cPKCs）在胃癌耐藥細(xì)胞系SGC7901/VCR1.0、耐藥亞系SGC7901/VCR0.3，SGC7901/VCR0.7及藥敏細(xì)胞系SGC7901表達(dá)及活性的變化，以及對細(xì)胞內(nèi)藥物濃度的影響. 方法 用免疫熒光化學(xué)及蛋白印跡方法觀察傳統(tǒng)型蛋白激酶C在胃癌耐藥細(xì)胞系及藥敏細(xì)胞系的表達(dá);競爭蛋白結(jié)合法測定PKC的活性;應(yīng)用流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞內(nèi)藥物濃度的變化. 結(jié)果 PKCα，PKCβⅠ ，PKCβ Ⅱ 及PKCγ在胃癌耐藥細(xì)胞系及藥敏細(xì)胞系均有表達(dá)，PKCα在耐藥細(xì)胞表達(dá)呈強陽性，在藥敏細(xì)胞表達(dá)呈陽性;PKCβⅠ 及PKCβⅡ 在耐藥細(xì)胞及藥敏細(xì)胞表達(dá)均為陽性;PKCγ在耐藥細(xì)胞及藥敏細(xì)胞表達(dá)均為強陽性.免疫蛋白印跡實驗證實，隨耐藥指數(shù)的增加，PKCα表達(dá)呈逐漸增高的趨勢，薄層掃描蛋白印跡帶的吸光度（A）分別為9584.17，9421.06，8534.64，8088.79，而PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ在耐藥細(xì)胞系、耐藥亞系及其藥敏細(xì)胞系表達(dá)無明顯變化.PKC活性檢測結(jié)果提示，隨耐藥指數(shù)的增加，PKC活性呈逐漸增高的趨勢，以細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核的PKC活性增高為主. 結(jié)論 傳統(tǒng)型蛋白激酶C在維持胃癌耐藥細(xì)胞系SGC7901/VCR的多藥耐藥中起重要作用且具有同工酶特異性.

Keywords:protein kinase C;isoenzyme;gastric cancer;mul-tidrug resistance

Abstract:AIM To observe the expression and activity of classic protein kinase C in gastric cancer cell SGC7901and its drug-resistant sublines SGC7901/VCR slected by vincristine of different concentration（0.3，0.7and1.0μg?mL-1 ）.To explore the effect of classic protein kinase C on drug concen-tration within gastric cancer cells.METHODS The expres-sion of classic protein kinase C in gastric cancer cells was de-termined by immuno-fluorescent method and Western blot.The PKC activity was determined by competed protein bind-ing method.The drug concentration within cells was deter-mined by FACS.RESULTS Both SGC7901and SGC7901/VCR cells exhibited positive staining of PKCα，PKCβⅠ ，PKCβⅡ and PKCγ.The staining of PKCαin SGC7901/VCR was much stronger than that in SGC7901.There were no dif-ferences in the expression of PKCβⅠ ，PKCβⅡ and PKCγbe-tween SGC7901and SGC7901/VCR.By using Western blot，continuous increasing expression of PKCαin SGC7901/VCR was demonstrated along with the increasing resistant index，as well as no differences between SGC7901and its drug-resis-tant sublines.Results of activity assay showed continuous in-creasing activity of PKC in gastric cancer cells along with in-creasing resistant index.CONCLUSION Classic protein ki-nase C plays an important role in multidrug resistance of gas-tric cancer cells with isoenzyme specificity.

0 引言

蛋白激酶C是一類廣泛分布的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶家族，目前發(fā)現(xiàn)至少有12種同工酶亞型.按其生化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)可分為四大類.由鈣、磷酯（PL）、二?；视停―AG）或佛波酯激活的PKC為傳統(tǒng)型（cPKCs）;不依賴鈣而由PL，DAG或佛波酯活化的PKC類為新型（nPKCs）;僅由PL類物激活的為非典型型（aPKCs）;PKCμ不需鈣、DAG激活，而由磷酯酰肌醇-4，5二磷酸激活，但在結(jié)構(gòu)上與前三種部分類似，故稱為第四種PKC［1，2］ .PKC具有異質(zhì)性，不同的PKC亞類位于不同類型的細(xì)胞以及同一細(xì)胞內(nèi)的不同部位，因而表現(xiàn)出不同的功能.近期研究提示，cPKCs可能參與了多藥耐藥的形成且具有同工酶特異性.本研究擬觀察cPKCs在胃癌耐藥細(xì)胞系、耐藥亞系和藥敏細(xì)胞系的表達(dá)及活性的變化以及對細(xì)胞內(nèi)藥物濃度的影響，以進(jìn)一步揭示信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子PKC在多藥耐藥發(fā)生中的作用.

1 材料和方法

1.1 材料 SGC7901細(xì)胞系由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院惠贈，耐藥細(xì)胞系SGC7901/VCR1.0及其耐藥亞系SGC7901/VCR0.3，SGC7901/VCR0.7由本室誘導(dǎo).兔抗人PKCα，PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ多克隆抗體購自Santa Cruz Biotechnology公司;羊抗兔IgG-FITC購自中山公司;辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔IgG購自武漢博士德公司;PKC活性分析試劑盒購自Gibcobrl公司;［γ-32 P］ATP購自北京亞輝公司.細(xì)胞生長于含100mL?L-1 已滅活小牛血清的RP-MI1640培養(yǎng)液中，37℃，50mL?L-1 CO2 的條件下培養(yǎng)，耐藥細(xì)胞培養(yǎng)液中分別加入0.3，0.7和1mg?L-1 長春新堿以維持耐藥表型，用于實驗前耐藥細(xì)胞在不加長春新堿的培養(yǎng)液中培養(yǎng)2wk.

1.2 方法

1.2.1 免疫熒光化學(xué) 取對數(shù)生長期的耐藥細(xì)胞SGC7901/VCR及藥敏細(xì)胞SGC7901，用2.5g?L-1 的胰酶消化傳代于裝有載玻片的培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)24h后，用PBS沖洗3次，冷丙酮固定［3，4］ .PBS洗3次，加50mL?L-1 H2 O2 室溫15min，水洗3次;3mL?L-1 Triton X-100室溫15min，吸去不洗;1∶10的血清封閉30min，吸去不洗;分別加兔抗人多克隆抗體PKCα（2mg?L-1 ），PKCβⅠ （2mg?L-1 ），PKCβⅡ （4mg?L-1 ）及PKCγ（4mg?L-1 ），37℃孵育1h，PBS洗3次;加羊抗兔IgG-FITC（1∶60），37℃孵育1h，PBS洗3次，用500mL?L-1 的緩沖甘油封片.實驗同時設(shè)PBS或無關(guān)抗體為替代一抗的陰性對照.

1.2.2 Western blot 收獲對數(shù)生長期的細(xì)胞并用冷PBS清洗2次，以裂解緩沖液［50mmol?L-1 Tris-Cl（pH7.5），150mmol?L-1 NaCl，0.2mmol?L-1 EDTA，1mmol?L-1 PMSF和10g?L-1 NP-40］裂解細(xì)胞制備細(xì)胞總蛋白，Bradford法測定蛋白濃度;取150μg總蛋白上樣進(jìn)行SDS-PAGE電泳，通過電轉(zhuǎn)移法將蛋白從聚丙烯酰胺凝膠轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素濾膜上，麗春紅S染色并標(biāo)記蛋白分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);去離子水漂去麗春紅后以50g?L-1 脫脂奶粉于室溫1h封閉濾膜，常規(guī)分別結(jié)合兔抗人PKCα，PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ多克隆抗體、辣根過氧化物 酶標(biāo)記的羊抗兔IgG，最后以DAB顯色目的條帶.

1.2.3 PKC活性檢測 參照文獻(xiàn)［5］并進(jìn)行改良取對數(shù)生長期的耐藥細(xì)胞系、耐藥亞系及藥敏細(xì)胞系，用2.5g?L-1 的胰酶消化傳代于10cm的培養(yǎng)皿中，至對數(shù)生長期，冷PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮收取細(xì)胞，加Buffer A1mL（Tris/EGTA/EDTA，β-巰基乙醇、蛋白酶抑制劑），用超聲粉碎機粉碎，每次20s，共3次，然后1000g離心15min，沉淀部分超聲粉碎后12000g離心10min，所得上清為細(xì)胞核部分;上清100000g4℃離心1h，所得上清為細(xì)胞質(zhì)PKC部分;所得沉淀部分加含10mL?L-1 Triton X-100的BufferA抽提細(xì)胞膜PKC30min，每10min震蕩1次，然后進(jìn)行超聲粉碎.蛋白定量用Bradford法，活性檢測步驟按試劑盒要求進(jìn)行，所測活性為cPKCs的總活性，PKC比活性用nmol?g-1 ?min-1 表示.

1.2.4 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)藥物濃度 參照文獻(xiàn)［6，7］進(jìn)行.取對數(shù)生長期細(xì)胞用2.5g?L-1 胰酶消化成單細(xì)胞懸液，接種6孔板并繼續(xù)培養(yǎng)48h.加阿霉素至終濃度為5mg?L-1 ，繼續(xù)培養(yǎng)1h，冷PBS洗3次，用細(xì)胞刮收獲細(xì)胞離心，再以冷PBS重新懸浮，保存于4℃，上流式細(xì)胞儀檢測.激發(fā)波長為488nm，接收波長為575nm.

統(tǒng)計學(xué)處理:用方差分析.

2 結(jié)果

2.1 免疫熒光化學(xué) PKCα在耐藥細(xì)胞系SGC7901/VCR表達(dá)呈強陽性，在藥敏細(xì)胞系SGC-7901表達(dá)呈陽性;PKCβⅠ 及PKCβⅡ 在耐藥細(xì)胞及藥敏細(xì)胞表達(dá)均呈陽性;PKCγ在耐藥細(xì)胞及藥敏細(xì)胞表達(dá)均呈強陽性.

2.2 Western blotting PKCα在耐藥細(xì)胞系及耐藥亞系較其藥敏細(xì)胞系表達(dá)明顯增加，隨耐藥指數(shù)的增加PKCα表達(dá)呈逐漸增加的趨勢，薄層掃描蛋白印跡帶的吸光度（A）分別為9584.17，9421.06，8534.64和8088.79（Fig1）.PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ在耐藥細(xì)胞及藥敏細(xì)胞無明顯差異（Fig1）.

2.3 PKC活性檢測結(jié)果 胃癌耐藥細(xì)胞SGC7901/VCR及其耐藥亞系與其藥敏細(xì)胞比PKC活性明顯增高，其中以細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核PKC活性增高比較明顯（Tab1）.

2.4 細(xì)胞內(nèi)藥物濃度 胃癌耐藥細(xì)胞SGC7901/VCR及其耐藥亞系與其藥敏細(xì)胞系比細(xì)胞內(nèi)藥物濃度明顯減低，且具有統(tǒng)計學(xué)意義（P

圖1 略

表1 胃癌耐藥細(xì)胞系及其藥敏細(xì)胞PKC活性　略

3 討論

傳統(tǒng)型蛋白激酶C，即鈣、磷酯依賴的蛋白激酶C，包括4種同工酶亞型PKCα，PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ，Mr 80000～90000.cPKCs亞型分布有明顯的組織特異性，如胰腺表達(dá)PKCα，PKCβⅡ ，而無PKCβⅠ 及PKCγ的表達(dá);腎上腺皮質(zhì)和髓質(zhì)細(xì)胞表達(dá)PKCα，而間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)PKCβⅠ 和PKCγ;人白血病細(xì)胞表達(dá)PKCα，PKCβ和PKCγ.不同PKC亞型選擇性器官分布提示它們在功能上的差異，多種亞型可在同一組織甚至同一細(xì)胞中存在，并介導(dǎo)不同的信號傳遞功能.我們觀察了cPKCs在胃癌耐藥細(xì)胞系及其藥敏細(xì)胞系的表達(dá)［8］ ，PKCα在耐藥細(xì)胞表達(dá)呈強陽性，在藥敏細(xì)胞表達(dá)呈陽性;PKCβⅠ ，PKCβⅡ 在耐藥細(xì)胞及藥敏細(xì)胞表達(dá)均呈陽性;PKCγ在耐藥細(xì)胞及藥敏細(xì)胞表達(dá)均呈強陽性.蛋白印跡實驗證實，隨耐藥指數(shù)的增加，PKCα的表達(dá)呈逐漸增高的趨勢，而PKCβⅠ ，PKCβⅡ 及PKCγ在耐藥細(xì)胞及藥敏細(xì) 胞的表達(dá)無明顯差異.提示PKCα在維持胃癌細(xì)胞的耐藥表型中可能起重要作用.

有研究表明，在體外建立的耐藥細(xì)胞株，較相應(yīng)的敏感株蛋白激酶C活性明顯增高［9］ .近年來也有研究表明耐藥細(xì)胞系PKC的表達(dá)及活性較其藥敏細(xì)胞系減低，但有趣的是這些細(xì)胞的基礎(chǔ)PKC表達(dá)及活性水平與細(xì)胞耐藥后PKC活性增高的細(xì)胞比高出許多倍，提示如果PKC活性的基礎(chǔ)水平比較高，MDR表達(dá)不一定伴有PKC活性的增高［10］ .上述事實說明，腫瘤細(xì)胞獲得MDR后，PKC活性的改變可能取決于親代細(xì)胞本身的特性以及所誘導(dǎo)的藥物類型.我們檢測了胃癌耐藥細(xì)胞系SGC7901/VCR1.0，SGC7901/VCR0.7及SGC7901/VCR0.3及其藥敏細(xì)胞SGC7901的PKC活性，提示細(xì)胞耐藥后PKC總活性、細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核的活性明顯增高，隨耐藥指數(shù)的增加呈逐漸增高的趨勢，細(xì)胞膜的PKC活性無明顯改變.可能是因為化療藥物長期誘導(dǎo)耐藥細(xì)胞導(dǎo)致PKC的表達(dá)增加，而PKC通常以無活性的形式存在于細(xì)胞質(zhì)，無化療藥物及其他刺激時細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的PKC含量較多，所以檢測到的結(jié)果細(xì)胞耐藥后細(xì)胞質(zhì)內(nèi)PKC的活性較高而細(xì)胞膜的活性無明顯變化，細(xì)胞核內(nèi)PKC活性的增高可能與維持MDR表型蛋白的基因轉(zhuǎn)錄與表達(dá)有關(guān).

MDR經(jīng)常與PKC的水平和活性有關(guān).從我們的實驗結(jié)果也可以看出，PKC活性水平的升高與PKCα的表達(dá)有明顯的相關(guān)性，隨耐藥指數(shù)的增加PKC的活性及PKCα的表達(dá)呈逐漸增高的趨勢，細(xì)胞內(nèi)藥物濃度呈逐漸減低的趨勢，更進(jìn)一步說明PKCα在維持胃癌細(xì)胞的耐藥表型中起重要作用.無論如何，對于PKC不同同工酶亞型與胃癌多藥耐藥性相關(guān)性的研究，為進(jìn)一步明確胃癌的多藥耐藥機制以及選擇逆轉(zhuǎn)耐藥的藥物將會提供有益的幫助.

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篇9

【關(guān)鍵詞】 肺耐藥相關(guān)蛋白 癌 非小細(xì)胞肺 組織學(xué)技術(shù)

［ABSTRACT］ObjectiveTo study the expression of lung resistancerelated protein (LRP) in nonsmall cell lung cancer (NSCLC) and its clinical significance. MethodsNSCLC specimens (n=72) were examined by the combined techniques of tissue chip and immunohistochemistry. The expression of LRP was quantitatively assessed by computer image analysis system. Chemotherapy was not performed in all cases before surgery. ResultsExpression of LRP was found mainly in the cytoplasm of NSCLC， few in cellular membrane. The total positive rate of LRP expression was 77.78％. The intensity of LRP immunostaining was related to the tissue type and differentiation of the cancer. The average density and accumulated density of LRP were higher in adenocarcinoma than in squamous cell carcinoma （t=6.977，6.114；P

［KEY WORDS］lung resistancerelated protein; carcinoma， nonsmall cell lung; histological techniques

肺癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率近年來也呈迅速上升趨勢。在我國一些大城市，其發(fā)病率占成年人惡性腫瘤發(fā)病率的第一位，已經(jīng)成為人類因腫瘤致死的首位病因，其中非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)占所有肺癌的75%～80%。NSCLC單純手術(shù)治療效果不佳，5年生存率平均只有50％左右。目前多采用手術(shù)與放、化療結(jié)合的綜合治療方案，化療仍是肺癌主要的治療手段之一［1］。腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的耐藥性是影響化療效果最常見而又最難解決的問題。已有許多研究表明，肺耐藥相關(guān)蛋白(LRP)過度表達(dá)與肺癌化療耐藥密切相關(guān)［2］。檢測LRP在NSCLC組織中的表達(dá)，以往多采用定性的方法，而檢測其定量表達(dá)目前未見報道。本研究應(yīng)用組織芯片及免疫組織化學(xué)技術(shù)結(jié)合形態(tài)學(xué)計量，檢測LRP在NSCLC組織中的定量表達(dá)，探討其與NSCLC生物學(xué)行為的關(guān)系，預(yù)測腫瘤對化療的敏感性，從而指導(dǎo)腫瘤化療。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來源

收集青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2003～2005年經(jīng)病理證實的非小細(xì)胞肺癌手術(shù)標(biāo)本共72例，均為石蠟包埋標(biāo)本，術(shù)前病人未進(jìn)行化療，其中年齡3 cm組42例；鱗癌30例，腺癌42例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組39例，淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組33例；高分化組16例，中分化組26例，低分化組30例；按臨床分期(1997年肺癌國際分期修正系統(tǒng)):Ⅰ期29例，Ⅱ期19例，Ⅲ期24例。復(fù)習(xí)全部病例的臨床病理資料及蘇木精伊紅染色切片，每例標(biāo)本選取癌組織典型代表區(qū)域，直徑約2 mm，制作成2枚組織芯蠟塊。

1.2 免疫組織化學(xué)染色

鼠抗人LRP單克隆抗體、PV9000檢測試劑盒及DAB顯色劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。4 μm厚組織芯石蠟切片脫蠟，系列乙醇水化至蒸餾水，體積分?jǐn)?shù)為0.03的過氧化氫滅活內(nèi)源性過氧化物酶，微波修復(fù)，采用免疫組織化學(xué)PV9000二步法染色，用DAB顯色。切片不進(jìn)行復(fù)染。用PBS代替一抗作為陰性對照，用已知的陽性切片作為陽性對照。

1.3 結(jié)果判定及形態(tài)學(xué)計量

以腫瘤細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒著色為陽性。應(yīng)用Simple PCI多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)對免疫組織化學(xué)染色后的病理圖像進(jìn)行定量分析。每例標(biāo)本在400倍視野下隨機選取100個陽性腫瘤細(xì)胞，測定其陽性顆粒的平均吸光度和積分吸光度，以此代表陽性腫瘤細(xì)胞內(nèi)LRP的相對含量。

2 結(jié)

果

2.1 LRP在NSCLC組織中的陽性表達(dá)

LRP在多數(shù)腫瘤細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜呈棕黃色顆粒著色，以細(xì)胞質(zhì)著色為主。總陽性表達(dá)率為77.78％。

2.2 LRP在NSCLC組織中的表達(dá)水平與生物學(xué)行為的關(guān)系

LRP在NSCLC組織表達(dá)水平與組織學(xué)類型有關(guān)，在腺癌中陽性顆粒的平均吸光度與積分吸光度均高于鱗癌(t=6.977、6.114，P

3 討

論

化療在NSCLC的治療中占有重要地位，但腫瘤細(xì)胞對化療藥物產(chǎn)生的耐藥性是導(dǎo)致化療失敗的主要原因。已知LRP與NSCLC化療耐藥密切相表1 LRP在NSCLC組織中的表達(dá)情況關(guān)。LRP作為人體的主要穹隆蛋白，廣泛分布于細(xì)胞器上。LRP在腫瘤耐藥中的作用需依賴ATP提供能量，使腫瘤細(xì)胞內(nèi)藥物外排而降低藥物濃度引起腫瘤耐藥，其主要通過兩種機制:一方面是使以細(xì)胞核為靶位的化療藥物不能進(jìn)入細(xì)胞核，或把已進(jìn)入細(xì)胞核的藥物轉(zhuǎn)運到細(xì)胞質(zhì);另一方面是把細(xì)胞質(zhì)中的藥物轉(zhuǎn)運到囊泡，再經(jīng)胞吐機制排到胞外［3］。有研究表明，LRP的表達(dá)與NSCLC化療耐藥密切相關(guān)，其在NSCLC組織中的表達(dá)水平可反映腫瘤組織對化療的敏感性［4］，且其高表達(dá)與NSCLC化療耐藥及預(yù)后不良密切相關(guān)［5］。

本實驗研究表明，LRP在NSCLC組織中的表達(dá)水平與組織學(xué)類型有關(guān)，在肺腺癌中的表達(dá)強度較鱗癌高，這與臨床上肺鱗癌較腺癌對化療敏感、療效較好相一致。另外，NSCLC中LRP在高分化組中的表達(dá)強度高于中、低分化組，且隨著腫瘤細(xì)胞分化程度的降低而表達(dá)降低，這與以往單純定性檢測耐藥蛋白結(jié)果不同。以往有學(xué)者采用數(shù)陽性細(xì)胞個數(shù)計算陽性率的方法進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)低分化組LRP表達(dá)陽性率高于高、中分化組［6］。而本研究應(yīng)用圖像分析結(jié)合組織芯片技術(shù)，采用陽性顆粒平均吸光度與積分吸光度代表陽性細(xì)胞內(nèi)LRP的相對含量，發(fā)現(xiàn)高分化組LRP表達(dá)強度明顯高于中、低分化組，這與臨床高分化癌對化療較不敏感相一致，說明蛋白定量分析比計數(shù)陽性細(xì)胞個數(shù)、陽性率能更好 地反映LRP在NSCLC組織中的表達(dá)水平。另外，LRP的表達(dá)強度與臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小及年齡無關(guān)，說明臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小及年齡與NSCLC化療耐藥無密切關(guān)系。與有關(guān)報道一致［7］。

本實驗采用組織芯片技術(shù)，將數(shù)十個微小的NSCLC組織塊有序地排列在一張組織芯上制成縮微組織切片，在相同實驗條件及相同判斷標(biāo)準(zhǔn)下，同時分析多個樣本中LRP的表達(dá)情況，比傳統(tǒng)的免疫組化方法更快速和準(zhǔn)確。同時，采用多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)對LRP免疫組化染色后的病理圖像進(jìn)行定量分析，避免了由于人眼對色彩強度的主觀感覺所造成的偏差。本研究結(jié)果顯示，對于同是免疫組化染色陽性的肺癌細(xì)胞，一些反映著彩強度的指標(biāo)，如平均吸光度與積分吸光度在不同組織學(xué)類型及不同分化程度之間存在著差別，這種差別單純應(yīng)用定性指標(biāo)無法充分顯示。因此，利用組織芯片技術(shù)與彩色病理圖像分析系統(tǒng)結(jié)合來檢測NSCLC中LRP的表達(dá)強度，能準(zhǔn)確了解非小細(xì)胞肺癌病人的耐藥情況，對于預(yù)測化療效果、選擇治療方案具有重要的臨床意義。

參考文獻(xiàn)

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篇10

【關(guān)鍵詞】　肝膿腫；體層攝影；X線計算機

肝膿腫多見于細(xì)菌性。早期及膿腫壁形成初期表現(xiàn)不典型，與肝癌、肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌等難以鑒別[1]。本文對我院臨床手術(shù)證實，CT表現(xiàn)不典型的26例肝膿腫CT資料進(jìn)行回顧性分析

1　資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析臨床手術(shù)證實，CT表現(xiàn)不典型的26例肝膿腫CT資料，著重分析CT表現(xiàn)不典型肝膿腫資料。男性19例，女性7例。年齡18-73歲，平均51歲。主要臨床癥狀均有發(fā)熱，且均有不規(guī)則服有抗生素史，不同程度肝區(qū)痛、叩痛；其中免疫力低下者4例。血AFP均為陰性。14例手術(shù)證實，12例抽膿證實，治療后好轉(zhuǎn)及縮小。

1.2 CT檢查 使用Philips MX8000雙排螺旋CT，層厚3.2-6.5mm，層間隔1.6-3.2mm。平掃基礎(chǔ)上行動態(tài)增強：用碘海醇75－100ml團(tuán)注，速率2.5-3.5ml/ s，動脈期（30s）、門脈期（60s）、延時期（2-7min）掃描，各期8-15s完成。

2　結(jié)果

2.1 單發(fā)病灶22例，多發(fā)病灶4例。其中免疫力低下者4例，手術(shù)史1例。

2.2 CT表現(xiàn) 病灶平掃呈低密度塊影。增強表現(xiàn)：（1）、周圍一過性強化，8例。見于動脈期，病灶周圍組織明顯強化，部份呈節(jié)段性分布。（2）、內(nèi)部乏血管征及周圍血管豐富征，18例。動脈期病灶內(nèi)部未壞死區(qū)無或缺少強化血管影，而病灶周圍見較豐富細(xì)小血管，呈包繞狀，2例并一過性強化。（3）、肝膿腫縮小6例，表現(xiàn)門脈期或平衡期病灶邊緣強化縮小，呈小囊樣不強化區(qū)。（4）、簇狀征，8例；病灶不均勻強化，多個不強化小囊樣聚集成團(tuán)或融合。（5）花瓣征，5例。病灶內(nèi)分隔樣強化。（6）、持續(xù)強化征，4例。病灶各期輕中度強化，持續(xù)至平衡期；（7）、門脈充盈缺損：病變所在區(qū)門脈支與門脈主干長條充盈缺損，2例，增強掃描未見強化。

2.3 診斷結(jié)果 5例誤診為肝癌，其中2例門血栓形成者；4例誤診為膽管細(xì)胞癌。

3　討論

3.1 臨床及病理 肝膿腫細(xì)菌性較多見。臨床癥狀常有發(fā)熱，肝區(qū)痛、叩痛，部份年齡大者臨床癥狀表現(xiàn)不典型。免疫力低下者易并發(fā)多臟器感染，臨床表現(xiàn)亦越復(fù)雜。病理上分炎癥期、膿腫初期、膿腫形成期。炎癥期肝細(xì)胞炎癥充血水腫，血液循環(huán)障礙，隨后病灶內(nèi)出現(xiàn)壞死。纖維肉芽增生，形成膿腫壁。周圍肝組織常伴充血水腫。病變不同階段，同一病灶不同部位CT表現(xiàn)不一樣。同時受致病菌毒力的影響。由于抗生素的廣泛應(yīng)用，肝膿腫表現(xiàn)不典型逐漸增多。

3.2 典型的肝膿CT表現(xiàn)：典型的肝膿見于膿腫壁形成期 ，CT表現(xiàn)為肝實質(zhì)內(nèi)囊樣低密度影。病灶內(nèi)出現(xiàn)氣體，增強環(huán)樣強化，與周圍水腫形成單環(huán)及多環(huán)影（靶征），診斷并不困難。

3.3 不典型肝膿腫，常見于膿腫炎癥期及膿腫形成初期 CT動態(tài)增強掃描一定程度可以反應(yīng)病變病理變化[2,3]。動脈期病灶周圍一過性強化，其機制可能與充血水腫血流增多、肝動脈-門脈短路、門脈分支阻塞血流減少及異常靜脈引流等有關(guān)，提示炎癥早期及膿腫形成初期可能，有助于鑒別診斷。但并非肝膿腫特有征象，研究顯示多種病變中均可能出現(xiàn)[4,5]。動脈期病灶內(nèi)部及周圍血管分析上，未見血管伸入病灶未壞死區(qū)，而較多量細(xì)小血管分布于外周，呈內(nèi)部乏血管征及周圍血管豐富包繞征?？紤]內(nèi)部未壞死區(qū)血循環(huán)的障礙，外周肉芽組織增生，充血及血供增多，提示膿腫壁形成初期的血供改變。肝膿腫縮小征表現(xiàn)病灶增強后較平掃縮小，形成縮小的低密度不強化灶，主要見于門脈期及平衡期。反映了炎癥期或不完全壞死，壞死周圍肝組織炎性水腫?！按貭钫鳌奔啊盎ò暾鳌庇邢嗨撇±砘A(chǔ)，多見于膿腫形成初期?！按貭钫鳌睘槎鄠€細(xì)小膿腫聚集成團(tuán)或融合?！盎ò暾鳌睘槎喾啃愿文撃[?！安≡畛掷m(xù)強化征”，表現(xiàn)為各期輕中度強化，持續(xù)至平衡期，仍至平衡期表現(xiàn)為稍高密度。報道認(rèn)為平衡期表現(xiàn)為稍高密度為“延時強化征”[3]。但通過筆者對強化區(qū)各期CT值測量，差異并不大，而平衡期肝實質(zhì)CT值降低較明顯，故認(rèn)為“延時強化征”是由于病灶造影劑外滲減慢，持續(xù)強化，肝實質(zhì)平衡期密度降低造成相對高密度，反映了化膿炎癥期或炎癥破壞后增生反應(yīng)。

3.4　不典型肝膿腫的鑒別診斷 不典型肝膿腫、肝細(xì)胞肝癌、膽管細(xì)胞癌均平掃均勻表現(xiàn)為低密度腫塊，易于誤診。增強掃描尤其動態(tài)增強掃描，有助于鑒別診斷。肝癌動脈期病灶內(nèi)易于見到豐富血管（畸形血管），強化呈“快進(jìn)快出”改變，而壞死區(qū)常見于中心區(qū)。一般不會出現(xiàn)病灶出縮小、簇狀征、花瓣征、持續(xù)性強化征。當(dāng)肝膿腫出現(xiàn)門脈內(nèi)血栓形成時，栓子強化與否是癌栓與血栓的鑒別點。膽管細(xì)胞癌增強掃描呈現(xiàn)漸進(jìn)性、向心性增強的強化特點和病灶內(nèi)部呈片狀、網(wǎng)格狀或線狀強化的特點[6]，不典型肝膿腫常易誤為膽管細(xì)胞癌， 病灶內(nèi)間隔細(xì)窄的更傾向于膿腫。

綜上所述，肝膿腫具有炎癥的一般規(guī)律，不同演變階段CT表現(xiàn)亦不同。不典型肝膿腫無較特征表現(xiàn)，動態(tài)增強掃描有一定特征表現(xiàn)，有助于提高診斷符合率。

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